楼主 发表于 2006-10-24 11:50|举报|关注(0)

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61 楼    发表于2006-10-24 22:11:00举报|引用

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1.加热后必须经过室温自然冷却20~30分钟，使未折叠的蛋白分子链恢复天然构型
2.抗原修复持续时间过后，取出放于室温中让其慢慢地降温，决不能为了争取时间，强行用冰块或冷水令其降温。这是因为当高温中的抗原蛋白分子链脱离了其它的束缚或联结，要有一个自然环境让其自然放松下来，随着温度的降低，它们会慢慢地恢复原来的形态和构型。如果用冰块和冷水强行令其降温，松开后的蛋白分子肽链突遇降温而固定下来，恢复不了原有的构型，达不到预想的效果。

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62 楼    发表于2006-10-24 22:09:00举报|引用

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由于常规石蜡切片标本均用甲醛固定，使抗原性物质由于形成醛键、羧甲键等原因而被封闭了部分抗原决定簇，或者由于蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐藏.抗原需要先进行抗原修复或暴露，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，恢复抗原的原有空间形态。
加热抗原修复后必须经过室温自然冷却20～30min，原因是使未折叠的蛋白分子链恢复天然构型,如果采用快速冷却可能会使蛋白分子复性时破坏天然结构,影响免疫反应!

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63 楼    发表于2006-10-24 12:33:00举报|引用

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呵呵，乱解一下。自然冷却可能的作用就是相当于修复的时间长了一些。可以做个试验。第一组标本按正常修复时间修复并自然冷却。第二组延长修复时间并快速冷却，并且又可分延长时间的不同，看看此时出来的效果，如果延长的某一时间的结果与自然冷却的一样，那么这个问题就解决了。
你试试吧，无非浪费一些试剂。

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岂能尽如人意，但求无愧我心！

64 楼    发表于2006-10-24 12:27:00举报|引用

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可能是让epitope(表位)恢复得更加好一点.

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