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骨髓:人体的主要造血器官。
组成:由分布于骨小梁之间的基质、血管、神经、网状组织和发育过程中的血细胞组成。
二、临床应用
1诊断造血系统疾病;
2诊断其它非造血系统疾病;
3不明原因的发热、恶病质、肝脾、淋巴结肿大、时血中出现幼稚细胞及其它血相变化。
三、血细胞的生成、发育规律、形态特点
1.血细胞的起源
造血干细胞的功能特点:自我更新和多向分化
血细胞的生成:-造血微环境、造血细胞生长因子
干细胞
祖细胞 各系原始细胞 幼稚细胞 成熟细胞
2.血细胞的发育过程
髓系:红细胞系统(Epo)
粒-单细胞系统:粒系 嗜中性
(GM-CSF) 嗜酸性
嗜碱性
单核系
巨核细胞系统(Meg-CSF和Tpo)
淋系:T淋巴细胞
B淋巴细胞----浆细胞
3.血细胞发育中形态学演变规律
原始→幼稚(红系和粒系:早幼、中幼和晚幼)→成熟
①胞体:大→小(原粒→早幼粒:由小→大。巨核细胞:小→大,且不规则)
②胞核:大 小:大→小(成熟红细胞核消失,巨核细胞:小→大)
形 状:圆→不规则
染色质:细致稀疏→粗糙致密,浅→深
核 仁:多→少→无 ,清晰→模糊→消失
③胞质:数量:少→多
染色:嗜碱、深染→嗜碱、淡染→嗜酸、淡染(单核细
胞和淋巴细胞仍嗜碱)
特殊物质(血红蛋白、特殊颗粒等):无→少→多
3.骨髓涂片检查
1)低倍镜检查:
(1)确定取材和涂片、染色是否满意
(2)判断骨髓增生程度
(3)巨核细胞计数
(4)观察有无异常细胞
2)油镜检查:
(1)有核细胞分类计数
(2)观察细胞形态
4.骨髓涂片镜检结果分析
1)骨髓增生程度—5级
2)骨髓各系细胞比例的正常范围
粒系:50-60%,原粒<1% 早幼粒<5%;
红系:20%,
淋巴系:20%
单核细胞系:<4%
浆细胞系统:<2%
巨核细胞:7-35个
其他细胞:极少量
3)骨髓各系细胞比例改变的临床意义
(1)粒细胞系统granulocytes
①粒系细胞增多
各型粒细胞性白血病
急性炎症和感染性疾病
类白血病反应
②粒系细胞减少
再生障碍性贫血
粒细胞缺乏或减少症
(2)红细胞系统erythron
①红系细胞增多
增生性贫血
急性红白血病
真性红细胞增多症
②红系细胞减少
再生障碍性贫血(纯红再障)
(3)粒/红比例(G/E )
参考值为2-4:1
a.比例正常:
①正常人骨髓;
②两系细胞同时或成比例增多或减少,如再生障碍性贫血、骨髓纤维化、骨髓瘤、骨髓转移癌等。
b.比例增加: G/E >5:1
①粒系细胞增多
②红系细胞生成受抑
c.比例减低: G/E <2:1
①粒系细胞减少
②红系细胞增多
(4)淋巴细胞系统lymphocytes
①淋巴细胞绝对性增多
急、慢性淋巴细胞性白血病
淋巴瘤
传染性淋巴细胞增多症
传染性单核细胞增多症
病毒感染
②淋巴细胞相对性增多
再生障碍性贫血
粒细胞缺乏或减少症
(5)单核细胞系统monocytes
增多
急性单核细胞性白血病
急性粒单细胞性白血病
骨髓增生异常综合征
感染性疾病
自身免疫性疾病
恶性肿瘤
(6)浆细胞系统plasmacytes
增多
多发性骨髓瘤
浆细胞白血病
巨球蛋白血症
反应性浆细胞增多
再生障碍性贫血、粒细胞缺乏
(7)巨核细胞系统megakaryocytes
a.增高:①特发性血小板减少性紫癜,
②Evans综合征
③骨髓增殖性疾病
④脾功能亢进和大出血后
⑤AML-M7
b.减低:①再生障碍性贫血
②急性白血病(除外AML-M7)
③其他骨髓病、放射病
④急性感染、中毒
4)有无特殊细胞及寄生虫
五、血细胞的细胞化学染色
(一)过氧化物酶(peroxidase,POX )
1.原理
2.结果 强阳性:胞质中蓝黑色颗粒粗大而密集
弱阳性:胞质中蓝黑色颗粒细小而稀疏
阴 性: 胞质中无蓝黑色颗粒者
3.正常参考值 POX主要存在于粒细胞系统,原粒细胞为阴性,随细胞的成熟反应越强,但嗜碱性粒细胞为阴性。
4.临床意义
阳性反应:急性粒细胞性白血病。
阴性反应:急性淋巴细胞性白血病。
(二)苏丹黑染色(Sudan black B stain,SB)
1.原理
2.结果和正常参考值 与POX染色大致相同。
3.临床意义 同POX染色反应。
(三)中性粒细胞碱性磷酸酶
(Neutrophli alkaline phosphatase,NAP)
1.原理
2.结果 NAP主要存在于成熟粒细胞胞浆中,其他血细胞均为阴性反应。
3.正常参考值
阳性率:平均为10%~40%
,以“
积分值:阳性积分值40 ~ 80 (分)。
4.临床意义
慢性粒细胞性白血病与类白血病反应的鉴别
阵发性睡眠性血红蛋白尿与再生障碍性贫血的鉴别
急性白血病类型的鉴别
其他血液病
其他情况
(四)非特异性酯酶染色(NSE)+NaF抑制试验
1.正常参考值
NSE主要存在于单核细胞中,从原单核细胞到成熟单核细胞逐渐增强,粒细胞一般呈阴性或弱阳性。
2.临床意义
急性单核细胞性白血病为强阳性,且可被氟化钠所抑制。
急性粒细胞性白血病与均为阴性或弱阳性,但阳性反应不被氟化钠所抑制。
急性淋巴细胞性白血病为阴性反应。
(五)糖原染色(periodic acid –Schiff’s reaction,PAS)
1.正常参考值
有核红细胞呈阴性反应;
淋巴细胞多呈阴性,少数弱阳性;
粒系中,原粒细胞糖原染色(-),早幼粒以下阶段为(+),逐渐增强;
单核细胞呈弱阳性反应;
巨核细胞和血小板呈阳性反应。
2.临床意义
鉴别红白血病与其他幼红细胞增多的疾病
鉴别良性与恶性淋巴细胞增生性疾病
三种急性白血病类型的鉴别
鉴别某些细胞类型:
(1)不典型的巨核细胞与李-斯(Reed-sternberg)细胞的鉴别:前者呈阳性反应,后者一般为阴性或弱阳性反应。
(2)高雪细胞与尼曼匹克细胞的鉴别:前者呈阳性反应,后者一般为阴性或弱阳性反应。
(3)腺癌细胞呈强阳性反应,骨髓转移时有助于与白血病细胞的鉴别。
(六)铁染色
1.结果
细胞外铁:按阳性强度(蓝色物质、蓝色颗粒、蓝色小珠)分为5级。
细胞内铁:以铁粒幼细胞所占的百分率表示。
环状铁粒幼细胞:10个以上的粗大铁粒,环绕细胞核排列超过核周径的2/3以上。
2.参考值
细胞外铁:一般为+或++
细胞内铁:阳性率为20~90%,平均为65%。细胞浆内常见1~5个铁染色颗粒。
3.临床意义
缺铁性贫血:细胞外铁明显降低或消失,细胞内铁阳性率减低,常<15%,细胞浆内铁粒变小、变淡。
非缺铁性贫血:恶性贫血、再生障碍性贫血、溶血性贫血时,细胞外铁多为++到+++,细胞内铁阳性率增加。
铁粒幼细胞性贫血:细胞内铁阳性率明显增加,并可见到环状铁粒幼细胞。
(七)酸性磷酸酶染色(acid phosphatase,ACP)
毛细胞呈阳性反应且不为L-酒石酸所抑制,有助于毛细胞白血病的诊断。
鉴别T淋巴细胞与B淋巴细胞。
鉴别高雪病和尼曼-匹克病:前者呈阳性反应,后者为阴性。
网状细胞、吞噬细胞、组织细胞和单核细胞均呈阴性反应。
(八)特异性酯酶染色(specific esterase,SE)
急性粒细胞性白血病呈强阳性反应
急性单核细胞白血病和急性淋巴细胞白血病均呈阴性反应
急性粒-单核细胞性白血病时,白血病细胞部分阳性,部分阴性
(二)细胞遗传学分析
临床常见白血病染色体改变
染色体改变 融合基因
M2 t(8;21)(q22;q22) AML1/ETO
M3 t(15:17)(q22;Q21) PML/RARα, RARα/PML
M4Eo int/del(16)(q22) CBFB/MYH11
M5 t/del(11)(q23) MLL/ENL
L3(B-ALL) t(8:14)(q24;q32) MYC与IgH并列
ALL(5-20%)
t(9:22)(q34;q11) bcr/abl,m-
bcr/abl
M3 PML/RARα------维A酸治疗有效的分子基础