骨髓:人体的主要造血器官。

组成：由分布于骨小梁之间的基质、血管、神经、网状组织和发育过程中的血细胞组成。

二、临床应用

1诊断造血系统疾病；

2诊断其它非造血系统疾病；

3不明原因的发热、恶病质、肝脾、淋巴结肿大、时血中出现幼稚细胞及其它血相变化。

三、血细胞的生成、发育规律、形态特点

1.血细胞的起源

造血干细胞的功能特点：自我更新和多向分化

血细胞的生成：-造血微环境、造血细胞生长因子

   干细胞  祖细胞  各系原始细胞  幼稚细胞  成熟细胞

2.血细胞的发育过程

髓系：红细胞系统(Epo)

      粒-单细胞系统：粒系       嗜中性

           (GM-CSF)             嗜酸性

                                嗜碱性

                                单核系

      巨核细胞系统(Meg-CSF和Tpo)

淋系：T淋巴细胞

      B淋巴细胞----浆细胞

3.血细胞发育中形态学演变规律

原始→幼稚（红系和粒系：早幼、中幼和晚幼）→成熟

①胞体：大→小（原粒→早幼粒：由小→大。巨核细胞：小→大,且不规则）

②胞核：大 小：大→小（成熟红细胞核消失，巨核细胞：小→大）

        形 状：圆→不规则

        染色质：细致稀疏→粗糙致密，浅→深

        核 仁：多→少→无 ，清晰→模糊→消失

③胞质：数量：少→多

        染色：嗜碱、深染→嗜碱、淡染→嗜酸、淡染（单核细

              胞和淋巴细胞仍嗜碱）

        特殊物质（血红蛋白、特殊颗粒等）：无→少→多

四、骨髓细胞形态学检查方法、内容及结果分析

（一）骨髓穿刺术

1. 骨髓穿刺的适应症

不明原因的一种或多种血液成分的减少，如各种白血病，再生障碍性贫血，溶血性贫血，血小板减少性紫癜等。

不明原因长期发热，如某些传染病或寄生虫病（疟疾、黑热病及伤寒等），有助于确定病原体。

不明原因的肝、脾、淋巴结肿大。

疑有骨髓原发性或转移性肿瘤。

借助骨髓内发现特殊细胞，诊断高雪氏病、尼曼匹克氏病。

2.骨髓穿刺的禁忌症

凝血功能障碍        

骨髓细胞形态学检查在临床诊断中的价值

肯定性诊断

符合性诊断

提示性诊断

除外性诊断

3.骨髓涂片检查

1）低倍镜检查：

（1）确定取材和涂片、染色是否满意

（2）判断骨髓增生程度

（3）巨核细胞计数

（4）观察有无异常细胞

2）油镜检查：

（1）有核细胞分类计数

（2）观察细胞形态

4.骨髓涂片镜检结果分析

1）骨髓增生程度—5级

2）骨髓各系细胞比例的正常范围

粒系：50-60%，原粒<1%  早幼粒<5%；

红系：20%，

淋巴系：20%

单核细胞系：<4%

浆细胞系统：<2%

巨核细胞：7-35个

其他细胞：极少量

3）骨髓各系细胞比例改变的临床意义

（1）粒细胞系统granulocytes

①粒系细胞增多

各型粒细胞性白血病

急性炎症和感染性疾病

类白血病反应

②粒系细胞减少

再生障碍性贫血

粒细胞缺乏或减少症

（2）红细胞系统erythron

①红系细胞增多

增生性贫血

急性红白血病

真性红细胞增多症

②红系细胞减少

再生障碍性贫血(纯红再障)

（3）粒/红比例(G/E )

参考值为2-4：1

a.比例正常：
①正常人骨髓；
②两系细胞同时或成比例增多或减少，如再生障碍性贫血、骨髓纤维化、骨髓瘤、骨髓转移癌等。
b.比例增加： G/E >5:1

①粒系细胞增多

②红系细胞生成受抑

c.比例减低： G/E <2:1
①粒系细胞减少
②红系细胞增多

（4）淋巴细胞系统lymphocytes

①淋巴细胞绝对性增多

急、慢性淋巴细胞性白血病

淋巴瘤

传染性淋巴细胞增多症

传染性单核细胞增多症

病毒感染

②淋巴细胞相对性增多

再生障碍性贫血

粒细胞缺乏或减少症

（5）单核细胞系统monocytes

增多

急性单核细胞性白血病

急性粒单细胞性白血病

骨髓增生异常综合征

感染性疾病

自身免疫性疾病

恶性肿瘤

（6）浆细胞系统plasmacytes

增多

多发性骨髓瘤

浆细胞白血病

巨球蛋白血症

反应性浆细胞增多

再生障碍性贫血、粒细胞缺乏

（7）巨核细胞系统megakaryocytes

a.增高：①特发性血小板减少性紫癜，

        ②Evans综合征

        ③骨髓增殖性疾病

        ④脾功能亢进和大出血后

        ⑤AML-M7

b.减低：①再生障碍性贫血

        ②急性白血病（除外AML-M7）

        ③其他骨髓病、放射病

        ④急性感染、中毒

4）有无特殊细胞及寄生虫

（二）骨髓活检的适应症

骨髓硬化症、骨髓纤维化症

骨髓转移癌：如乳腺癌、肺癌、前列腺癌、胃癌等

淋巴瘤：

再生障碍性贫血：骨髓活检可了解骨髓造血组织的多少

骨髓增生异常综合征：骨髓活检组织切片的原始细胞分布异常（ALIP）现象对其诊断有重要意义

骨髓活检对骨髓坏死或脂肪髓的判断也有意义

五、血细胞的细胞化学染色

（一）过氧化物酶（peroxidase，POX )

1.原理

2.结果  强阳性：胞质中蓝黑色颗粒粗大而密集

        弱阳性：胞质中蓝黑色颗粒细小而稀疏

        阴  性: 胞质中无蓝黑色颗粒者

3.正常参考值 POX主要存在于粒细胞系统，原粒细胞为阴性,随细胞的成熟反应越强，但嗜碱性粒细胞为阴性。

4.临床意义

      阳性反应：急性粒细胞性白血病。

      阴性反应：急性淋巴细胞性白血病。

（二）苏丹黑染色（Sudan black B stain，SB）

1.原理

2.结果和正常参考值  与POX染色大致相同。

3.临床意义  同POX染色反应。

（三）中性粒细胞碱性磷酸酶

(Neutrophli alkaline phosphatase，NAP)

1.原理

2.结果   NAP主要存在于成熟粒细胞胞浆中，其他血细胞均为阴性反应。

3.正常参考值

   阳性率：平均为10％～40％ ，以“十”阳性反应为主。

   积分值：阳性积分值40  ～ 80 （分）。

4.临床意义

慢性粒细胞性白血病与类白血病反应的鉴别

阵发性睡眠性血红蛋白尿与再生障碍性贫血的鉴别

急性白血病类型的鉴别

其他血液病

其他情况

（四）非特异性酯酶染色（NSE）+NaF抑制试验

1.正常参考值

 NSE主要存在于单核细胞中，从原单核细胞到成熟单核细胞逐渐增强，粒细胞一般呈阴性或弱阳性。

2.临床意义

急性单核细胞性白血病为强阳性，且可被氟化钠所抑制。

急性粒细胞性白血病与均为阴性或弱阳性,但阳性反应不被氟化钠所抑制。

急性淋巴细胞性白血病为阴性反应。

（五）糖原染色(periodic acid –Schiff’s reaction，PAS)

1.正常参考值

有核红细胞呈阴性反应；

淋巴细胞多呈阴性，少数弱阳性；

粒系中，原粒细胞糖原染色（－），早幼粒以下阶段为（+），逐渐增强；

单核细胞呈弱阳性反应；

巨核细胞和血小板呈阳性反应。

2.临床意义

鉴别红白血病与其他幼红细胞增多的疾病

鉴别良性与恶性淋巴细胞增生性疾病

三种急性白血病类型的鉴别

鉴别某些细胞类型：

（1）不典型的巨核细胞与李-斯（Reed-sternberg）细胞的鉴别：前者呈阳性反应，后者一般为阴性或弱阳性反应。

（2）高雪细胞与尼曼匹克细胞的鉴别：前者呈阳性反应，后者一般为阴性或弱阳性反应。

（3）腺癌细胞呈强阳性反应，骨髓转移时有助于与白血病细胞的鉴别。 

（六）铁染色

1.结果

细胞外铁：按阳性强度（蓝色物质、蓝色颗粒、蓝色小珠）分为5级。

细胞内铁：以铁粒幼细胞所占的百分率表示。

   环状铁粒幼细胞：10个以上的粗大铁粒，环绕细胞核排列超过核周径的2/3以上。

2.参考值

细胞外铁：一般为+或++ 

细胞内铁：阳性率为20~90%，平均为65%。细胞浆内常见1~5个铁染色颗粒。

3.临床意义

缺铁性贫血：细胞外铁明显降低或消失，细胞内铁阳性率减低，常<15%，细胞浆内铁粒变小、变淡。

非缺铁性贫血：恶性贫血、再生障碍性贫血、溶血性贫血时，细胞外铁多为++到+++，细胞内铁阳性率增加。

铁粒幼细胞性贫血：细胞内铁阳性率明显增加，并可见到环状铁粒幼细胞。

（七）酸性磷酸酶染色（acid phosphatase，ACP）

毛细胞呈阳性反应且不为L-酒石酸所抑制，有助于毛细胞白血病的诊断。

鉴别T淋巴细胞与B淋巴细胞。

鉴别高雪病和尼曼-匹克病:前者呈阳性反应，后者为阴性。

网状细胞、吞噬细胞、组织细胞和单核细胞均呈阴性反应。

（八）特异性酯酶染色（specific esterase，SE）

急性粒细胞性白血病呈强阳性反应

急性单核细胞白血病和急性淋巴细胞白血病均呈阴性反应

急性粒-单核细胞性白血病时，白血病细胞部分阳性，部分阴性

六、免疫分型及细胞遗传学分析

（一）细胞免疫分型

即细胞免疫标记检测，是利用单克隆抗体及免疫学技术对细胞膜表面和/或细胞内存在的特异性抗原进行检测。

常用：流式细胞仪（FCM）

临床应用

识别不同系列的细胞

识别不同的淋巴细胞

检测T淋巴细胞亚群

识别不同分化阶段的细胞

识别不同功能状态的细胞

分离、鉴定不同系列和不同分化阶段的细胞

白血病免疫分型

白血病微小残留病的检测

（二）细胞遗传学分析

临床常见白血病染色体改变

             染色体改变                  融合基因

M2          t(8;21)(q22;q22)             AML1/ETO

M3          t(15:17)(q22;Q21)      PML/RARα， RARα/PML

M4Eo        int/del(16)(q22)             CBFB/MYH11

M5           t/del(11)(q23)          MLL/ENL

L3(B-ALL)     t(8:14)(q24;q32)     MYC与IgH并列

ALL（5-20%）  t(9:22)(q34;q11)   bcr/abl,m- bcr/abl

M3  PML/RARα------维A酸治疗有效的分子基础  

 期待哦。。。。天山望月辛苦了！

 很受学习

天山望月辛苦了

 太好了，有了好材料，以后就可以学习入门啦！

谢谢！