回复:8 阅读:3920
请教各位老师,如何提取石蜡组织的DNA

llj19971997 离线

帖子:21
粉蓝豆:53
经验:99
注册时间:2011-03-28
加关注  |  发消息
楼主 发表于 2012-08-02 14:31|举报|关注(1)
浏览排序[ 顺序 逆序 楼主 支持 精彩 ]  快捷回复

 我尝试提取石蜡组织的DNA,为什么量少,而且OD值只有1.5.

请给位老师给我指点一下。关键在哪几步?

具体是8um,三张切片。二甲苯脱蜡过夜。酒精脱苯(此时在75度,20min)。用裂解液孵育1h,再加蛋白酶k至终浓度为500ug/ml过夜(55度)。平衡酚提取一次,酚/氯仿/异丙醇提取一次,氯仿/异丙醇提取一次。加入1/10的乙酸钠,二倍体积的无水乙醇,-20度过夜,离心。加70%乙醇离心,用高压灭菌的水溶解。

在整个提取过程中没有看到明显的沉淀,为什么呢?

标签:
0
signature
happy
添加参考诊断
×参考诊断
  
回复:8 阅读:3920
【免责声明】讨论内容仅作学术交流之用,不作为诊疗依据,由此而引起的法律问题作者及本站不承担任何责任。
快速回复
进入高级回复
您最多可输入10000个汉字,按 "Ctrl" + "Enter" 直接发送
搜索回复/乘电梯 ×
按内容
按会员
乘电梯
合作伙伴
友情链接