这些图片 1、 直接拿了  广州华侨医院的现成片子 （细胞很散的几张） 

2、 用我们科制成的白片 拿去 中山医  染色的（染色好但是细胞聚集严重的）

因为我们这里技术员不给进修学习的机会，所以也看不到人家怎么操作，试剂怎么配的。

请教丁伟老师，我们的TCT哪些方面需要改进？怎么改呢？

不胜感谢！

总的来说你的片子质量应该算不错的，细胞堆积并不严重，细胞堆积与不堆积是机器性能的问题，我改不了。“染色不鲜艳，灰蒙蒙的，细胞核也不够清晰，高倍没法看 ”，颜色应该也算正常，核略灰，不知是苏木素陈旧还是封片没有经过二甲苯透明？还是片子染色前有干过？希望你查一下。

先感谢丁老师抽空回帖指导！

我们这的TCT机是买试剂白送的，已经坏了几次又换了几次了

，对它的性能，我们自己也不抱多高的期望。上次贴的图是选了几张稍微好的，做得太丑的没敢拿出来……

1、苏木素是以前配好的，不久之前拿来用的，应该不会有什么问题吧？

2、我们整个制片染色的过程也就差不多1个半小时，一般不会出现片子干透的现象。

3、二甲苯透明我一般都作的，但是别人做TCT怎么做我就不敢保证了（我们科的技术员普遍讨厌二甲苯）。

另外。附上今天我自己染的TCT图片，具体染色过程： 95%酒精固定25钟-梯度酒精至水-苏木素5分钟-盐酸酒精分化3秒-碳酸锂碱化30秒-流水冲3分钟-EA36分钟（500ml EA 加了大约 15ml冰醋酸）-梯度酒精脱水-二甲苯透明-封片

 另外还想向丁伟老师请教：

1、水溶性伊红和醇溶性伊红 的着色能力 有差别么？巴氏染色中 您一般喜欢用那种？

2、EA36中一般加不加冰醋酸? 我加了冰醋酸之后，兰绿色、红色对比确实更明显了，可是那种颜色给人的感觉很"山寨"，就不是纯正的红色和绿色。尤其是跟您和白雪老师展示的片子比。

3、如果不太麻烦您的话，能传授我手工制作TCT的具体方法么，实在受不了我们科的免费国产机了。

再一次非常感谢！

 我来说两句，你们片子在低倍镜下，小图片看还是不错的，高倍下面就会觉得细胞核一团糊，根本看不清结构，是么？这是细胞保存得不好的原因，你可以做一张传统涂片对比看看（但是传统图片要固定及时），绝对要比你现在的细胞染色效果好。

结论：细胞保存不良，怎么染色都染不好，尽管你那么用心。

 刚看了你另一贴：

1、水溶性伊红和醇溶性伊红区别不在于着色能力， 而在于用醇溶性伊红染后颜色呈荧光色，更鲜艳。巴氏染色中应该用醇溶性伊红。

2、EA36中关键是配好后的pH值，一般要用碳酸锂溶液调至5.2-5.5

3、手工制作TCT的具体方法没有意义，和沉降式一样，还不如做沉降式，不需要买机器，只要一台离心机，厂家会提供。进口机器我们也是送阿，只要你有量，厂家就会送。

 谢谢丁老师和城北老师 对我的热心指导。

我们这的机器是膜式的，但不知道是不是保存液有问题，做出来就是这个样子，从收到TCT标本那一刻起，绝对没有干片，也没有需要加温的操作。据我们主任说广州华侨医院也是用同样的机型，但是他们的TCT片子我看细胞就打得很散，很漂亮，真是想破头也不知道为什么了。真希望有机会出去观摩学习一下

醇融性伊红暂时我们科没有，等打报告上去买回来再说吧。

我们科没有测酸碱度的仪器，只有ph试纸，一放进EA36就全染色了。PH值也没法测。郁闷！

我觉得作为一个技术员，天天看着这些灰蒙蒙的片子完全没有成就感！

可是我只是个干了2年的小技术员，又不能提要求买这买那，又缺乏进修的机会，一直闭门造车，心有余而立不足啊~

只是一个巴氏染色就难倒我了，我还有很多特染、免组等等问题可怎么办啦~

要是让我去省级医院系统进修3个月就好了。

顺便发了很多牢骚，请老师们见谅~

 原来看似简单的过程还有暗藏玄机！ 我真得不知道……明天做片子的时候用手指感受一下片子的温度。

明天我打算 重新配一次 EA36，把亮绿的成分调高一点，再用普通涂片跟tct片子 一起 染一次看看效果。

今天试剂商发了一套试剂(南京东大迪艾出的)过来（包括苏木素、稀碳酸锂、桔黄G、EA50），

因为机器出了点问题，下午才修好，刚刚才染了一批出来，没时间取图了，明天再贴图出来。

我只能说：染出来效果确实好！ 核膜核仁染色质均比较清楚，

胞浆的清晰度，背景的干净程度，都比我们以前的好太多！

差距阿~

换了商业试剂之后的染色效果，RT（制片因为机器的原因，依然很烂，关键看点在 核的染色 比以前清洗很多。）

看来我还得从最基本的试剂配置 入手去解决问题…………

回楼上的： 这套试剂的苏木素是常规不用分化的，直接流水。。。。。

 我觉得核的细节还是没有大的改观（图9显示的核非常模糊），从几张高倍的图片可以看得出来。

这不是染液试剂的原因，也不是光改善染液试剂就能完全解决的，我们做过一些国产牌子的片子染色，都是和新柏氏的片子一起染色，同样的条件下，片子出来的效果可是千差万别。