共1页/14条首页上一页1下一页尾页
回复:14 阅读:6265
免疫组化固定问题

shanghainese 离线

帖子:1136
粉蓝豆:25
经验:1155
注册时间:2006-09-26
加关注  |  发消息
楼主 发表于 2006-10-13 10:00|举报|关注(0)
浏览排序[ 顺序 逆序 楼主 支持 精彩 ]  快捷回复

做免疫组化,首先要对组织进行处理.
而对组织进行处理第一步就是要对组织细胞进行固定.
出几个问题请大家来讨论. 希望大家发表各自的看法,各自的经验和日常的处理方法,即使说的不太正确也没问题. 不要搬专家和直接抄书本.
这个问题关系到免疫组化的成败.
1.  为什么要固定?
2.  固定的目的?
3.  选用什么样的固定剂?
4.  固定的方法?
5.  固定的时间?


谢谢!

标签:
0
添加参考诊断
×参考诊断
  

shanghainese 离线

帖子:1136
粉蓝豆:25
经验:1155
注册时间:2006-09-26
加关注  |  发消息
1 楼    发表于2006-11-22 09:05:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复
以下是引用轻风飞扬 在2006-11-21 15:56:00的发言:

修复的问题说法和做法都太多了,什么时候来能出一个相对固定的标准啊?

很难很难。
0
回复

轻风飞扬 离线

帖子:2
粉蓝豆:1
经验:2
注册时间:2006-10-17
加关注  |  发消息
2 楼    发表于2006-11-21 15:56:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复
修复的问题说法和做法都太多了,什么时候来能出一个相对固定的标准啊?
0
回复

shanghainese 离线

帖子:1136
粉蓝豆:25
经验:1155
注册时间:2006-09-26
加关注  |  发消息
3 楼    发表于2006-10-30 10:28:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复
以下是引用意义 在2006-10-28 14:00:00的发言:

谢谢上海老师,您推荐的网站全是英文,我看不懂,有中文的吗?谢谢!!

等我找到了中文的,一定告诉您.
0
回复

意义 离线

帖子:319
粉蓝豆:235
经验:1164
注册时间:2006-10-20
加关注  |  发消息
4 楼    发表于2006-10-28 14:00:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复
谢谢上海老师,您推荐的网站全是英文,我看不懂,有中文的吗?谢谢!!
0
回复
signature
干到老学到老

197 离线

帖子:4781
粉蓝豆:803
经验:5032
注册时间:2006-09-12
加关注  |  发消息
5 楼    发表于2006-10-26 23:42:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复
"另外选用哪种抗原修复方法不能只看有没有颜色,而是要看它染色的部位是否正确.才能决定哪种抗体适合哪种抗原修复方法. "
颜色问题真是太重要了,肉眼看上去染色不错,镜下一看哭笑不得,该阳性的地方不阳性。象是ER/ PR, 有时核不阳性胞浆阳性,唉。
0
回复
signature
“人生没有彩排,每一天都是现场直播”

shanghainese 离线

帖子:1136
粉蓝豆:25
经验:1155
注册时间:2006-09-26
加关注  |  发消息
6 楼    发表于2006-10-23 01:35:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复
本帖最后由 于 2006-10-23 09:28:00 编辑
以下是引用197 在2006-10-22 21:29:00的发言:

那么请问上海老师,现在流行的高压锅修复是不是全部太高了?

抗原修复方法没有什么流行,只有适合. 只要适合就可以了.
由于抗体与抗原反应的表位比较复杂, 抗原被福尔马林固定后许多抗原反应的表位发生了改变.这就影响了抗体抗原的反应.抗原修复法是没有办法的办法,目的是希望通过物理,化学,酶消化等方法让那些抗原的表位再出来或恢复.但是目前所有的抗原修复方法只能将一小部分抗原的表位恢复过来. 所以大部分的抗体(单抗)不能用在福尔马林固定的石腊切片上.
没有一种抗原修复法是万能的, 因此只有在黑暗中摸索. 就象瞎猫碰死老鼠,碰上哪个算哪个.
高压锅修复有好的一面, 但它不是全能的. 不好的一面,它对细胞破坏较大.
另外选用哪种抗原修复方法不能只看有没有颜色,而是要看它染色的部位是否正确.才能决定哪种抗体适合哪种抗原修复方法.
0
回复

197 离线

帖子:4781
粉蓝豆:803
经验:5032
注册时间:2006-09-12
加关注  |  发消息
7 楼    发表于2006-10-22 21:29:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复
以下是引用shanghainese 在2006-10-21 13:09:00的发言:

1.  把切片与修复液放在微波炉加热到摄氏90度(不要煮沸,有难度)
2.  把液体混匀(修复液温度混匀)
3.  在微波炉里用低功率档维持温度90度, 10分钟.
4.  把切片与修复液从微波炉取出,加上盖, 让它在室温自然冷却20到30分钟.

以上方法仅供参考.

那么请问上海老师,现在流行的高压锅修复是不是全部太高了?
0
回复
signature
“人生没有彩排,每一天都是现场直播”

shanghainese 离线

帖子:1136
粉蓝豆:25
经验:1155
注册时间:2006-09-26
加关注  |  发消息
8 楼    发表于2006-10-22 12:55:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复
以下是引用信子 在2006-10-21 22:45:00的发言:

大家好!我是新来的

欢迎您!
我们都是新来的.
0
回复

信子 离线

帖子:32
粉蓝豆:1
经验:139
注册时间:2006-10-21
加关注  |  发消息
9 楼    发表于2006-10-21 22:45:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复
大家好!我是新来的
0
回复

shanghainese 离线

帖子:1136
粉蓝豆:25
经验:1155
注册时间:2006-09-26
加关注  |  发消息
10 楼    发表于2006-10-21 13:09:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复
1.  把切片与修复液放在微波炉加热到摄氏90度(不要煮沸,有难度)
2.  把液体混匀(修复液温度混匀)
3.  在微波炉里用低功率档维持温度90度, 10分钟.
4.  把切片与修复液从微波炉取出,加上盖, 让它在室温自然冷却20到30分钟.

以上方法仅供参考.
0
回复

shanghainese 离线

帖子:1136
粉蓝豆:25
经验:1155
注册时间:2006-09-26
加关注  |  发消息
11 楼    发表于2006-10-21 12:56:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复
以下是引用 在2006-10-21 9:59:00的发言:

请教抗原修复你们用什么方法?请介绍一下微波炉修复方法,谢谢。

您可以看看下面的文章.
http://www.jhc.org/cgi/content/full/45/3/327
0
回复

意义 离线

帖子:319
粉蓝豆:235
经验:1164
注册时间:2006-10-20
加关注  |  发消息
12 楼    发表于2006-10-21 09:59:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复

请教抗原修复你们用什么方法?请介绍一下微波炉修复方法,谢谢。

0
回复
signature
干到老学到老

shanghainese 离线

帖子:1136
粉蓝豆:25
经验:1155
注册时间:2006-09-26
加关注  |  发消息
13 楼    发表于2006-10-21 09:50:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复

很好.
谢谢您!

0
回复

197 离线

帖子:4781
粉蓝豆:803
经验:5032
注册时间:2006-09-12
加关注  |  发消息
14 楼    发表于2006-10-20 18:40:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复
我也说说自己仅有的一点点谈不上经验的看法,呵呵,旨在抛砖引玉。
第一个问题,和第二个问题 觉得是同一个问题。固定是为了保存抗原或别的想要保持的物质,比如,蛋白质、多糖等等,也是防止自溶。
据说4%中性缓冲福尔马林不错,我正用着;不过以前用自来水配的福马林也对付着能用,没觉得不好,反正是,平时我们的免疫组化也只是对付着看,呵呵。
固定,据说是4~8小时,我们的大标本没切开前能固定一日到三日不等,切开成小块了就固定三、四个小时吧。
个人觉得应该是乘新鲜时切成小块再固定4~8小时可能比较好些。
0
回复
signature
“人生没有彩排,每一天都是现场直播”
回复:14 阅读:6265
共1页/14条首页上一页1下一页尾页
【免责声明】讨论内容仅作学术交流之用,不作为诊疗依据,由此而引起的法律问题作者及本站不承担任何责任。
快速回复
进入高级回复
您最多可输入10000个汉字,按 "Ctrl" + "Enter" 直接发送
搜索回复/乘电梯 ×
按内容
按会员
乘电梯
合作伙伴
友情链接