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免疫组化固定问题

shanghainese 离线

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楼主 发表于 2006-10-13 10:00|举报|关注(0)
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做免疫组化,首先要对组织进行处理.
而对组织进行处理第一步就是要对组织细胞进行固定.
出几个问题请大家来讨论. 希望大家发表各自的看法,各自的经验和日常的处理方法,即使说的不太正确也没问题. 不要搬专家和直接抄书本.
这个问题关系到免疫组化的成败.
1.  为什么要固定?
2.  固定的目的?
3.  选用什么样的固定剂?
4.  固定的方法?
5.  固定的时间?


谢谢!

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shanghainese 离线

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1 楼    发表于2006-11-22 09:05:00举报|引用
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以下是引用轻风飞扬 在2006-11-21 15:56:00的发言:

修复的问题说法和做法都太多了,什么时候来能出一个相对固定的标准啊?

很难很难。
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2 楼    发表于2006-10-30 10:28:00举报|引用
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以下是引用意义 在2006-10-28 14:00:00的发言:

谢谢上海老师,您推荐的网站全是英文,我看不懂,有中文的吗?谢谢!!

等我找到了中文的,一定告诉您.
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3 楼    发表于2006-10-23 01:35:00举报|引用
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本帖最后由 于 2006-10-23 09:28:00 编辑
以下是引用197 在2006-10-22 21:29:00的发言:

那么请问上海老师,现在流行的高压锅修复是不是全部太高了?

抗原修复方法没有什么流行,只有适合. 只要适合就可以了.
由于抗体与抗原反应的表位比较复杂, 抗原被福尔马林固定后许多抗原反应的表位发生了改变.这就影响了抗体抗原的反应.抗原修复法是没有办法的办法,目的是希望通过物理,化学,酶消化等方法让那些抗原的表位再出来或恢复.但是目前所有的抗原修复方法只能将一小部分抗原的表位恢复过来. 所以大部分的抗体(单抗)不能用在福尔马林固定的石腊切片上.
没有一种抗原修复法是万能的, 因此只有在黑暗中摸索. 就象瞎猫碰死老鼠,碰上哪个算哪个.
高压锅修复有好的一面, 但它不是全能的. 不好的一面,它对细胞破坏较大.
另外选用哪种抗原修复方法不能只看有没有颜色,而是要看它染色的部位是否正确.才能决定哪种抗体适合哪种抗原修复方法.
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4 楼    发表于2006-10-22 12:55:00举报|引用
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以下是引用信子 在2006-10-21 22:45:00的发言:

大家好!我是新来的

欢迎您!
我们都是新来的.
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5 楼    发表于2006-10-21 13:09:00举报|引用
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1.  把切片与修复液放在微波炉加热到摄氏90度(不要煮沸,有难度)
2.  把液体混匀(修复液温度混匀)
3.  在微波炉里用低功率档维持温度90度, 10分钟.
4.  把切片与修复液从微波炉取出,加上盖, 让它在室温自然冷却20到30分钟.

以上方法仅供参考.
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6 楼    发表于2006-10-21 12:56:00举报|引用
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以下是引用 在2006-10-21 9:59:00的发言:

请教抗原修复你们用什么方法?请介绍一下微波炉修复方法,谢谢。

您可以看看下面的文章.
http://www.jhc.org/cgi/content/full/45/3/327
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shanghainese 离线

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7 楼    发表于2006-10-21 09:50:00举报|引用
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很好.
谢谢您!

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