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请教:Harris苏木素的配制问题?

bb1982120 离线

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楼主 发表于 2007-02-22 15:43|举报|关注(0)
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本科最近好长时间以来,配制苏木素过程中,加入氧化汞的时候,溶液没有任何反应。不知为何??
苏木精、硫酸铝钾、氧化汞都是新购置的。
这样配制的苏木素染液,刚开始染色核染色较淡,而且发乌。半月后染色能力增强,但核染色仍不够蓝。
请各位老师赐教!
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197 离线

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1 楼    发表于2007-02-23 15:10:00举报|引用
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本帖最后由 于 2007-02-23 15:21:00 编辑

 以下是梁英杰老师等人推荐的配方,供您参考。您还可以给丁老师他们发消息再详细请教。
一、改良Lillie-Mayers苏木素
                    
苏木素                  2.5 g
                    
无水酒精
               20 ml 
                    
硫酸铝钾
               25 g
                    
蒸馏水
                  330 ml
                    
碘酸钠
                  250 mg
                    
甘油
                    150 ml
                    
冰醋酸
                   10 ml
      
分别用无水酒精溶解苏木素,蒸馏水溶解硫酸铝钾,然后两液混合后,依次加  入碘酸钠、甘油和冰醋酸。

苏木素染液极少氧化膜,染色时很少污染片子,较Harris苏木素耐用,配法简单。
配好后马上用要染5-6分钟,两三天后染2-3分钟即可。配液非常简单,用磁力搅拌器搅拌溶解硫酸铝钾,不用加热,你忙完事情硫酸铝钾也溶好了,再加其他试剂,搅拌。。。。。。
二、Gill改良苏木素液
    
苏木精       2  g            无水酒精     250 ml
     
硫酸铝     17.6 g            蒸馏水
       750 ml
     
碘酸钠      0.2 g            冰醋酸
       20  ml

三、中华医学会出版的《临床技术操作规范》对于Gill改良方法是如下纪录:
 
      苏木素 2 g 
            无水乙醇  250ml 
              硫酸铝钾  17g 
              蒸馏水   750ml 
              碘酸钠  200mg    
            
冰醋酸
  20ml

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197 离线

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2 楼    发表于2007-02-25 23:15:00举报|引用
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以下是引用zxh887119 在2007-2-25 10:03:00的发言:

 谁在用"一、改良Lillie-Mayers苏木素"配方?

我。
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ZXH887119 离线

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3 楼    发表于2007-02-26 17:13:00举报|引用
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我原来用的也是碘酸钠,但染色时间较长,要10到20分钟.现准备改用 "改良Lillie-Mayers苏木素"法.

但有几个问题:

配制的问题:1\无水酒精溶解苏木素时要加热吗?

2\250 mg碘酸钠不容易称准确,要称准吗?

3\碘酸钠加入后应该充分搅拌,然后再加入甘油 ,最后加入冰醋本能,我们感觉到应该敞开放置,这样染色更好.你们有这样的经验吗?

使用的问题:1\我们是用在细胞学染色,配制好后是不是可以马上使用,染色时间?

2\大概到几天以后可以比较固定染色时间,染色时间不再缩短了?

3\多少时间更换?

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197 离线

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4 楼    发表于2007-02-26 23:25:00举报|引用
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本帖最后由 于 2007-02-26 23:26:00 编辑

 不用加热;碘酸钠应该能称准吧,实在不行,用高级分析天平

敞开放置没试过,您不妨试试;

我们是两月更换差不多;染色时间先短后长,据说与不同的批号产家的染料都有关,少时不到一分钟,多时五六分钟大概;用久了,背景细胞浆似比较灰。个人觉得也许可以做几个尝试:,比如,或许配制时减少醋酸量能不使染色速度太快。据说有的苏木素配方是新配的与用旧的混合起来使用非常好,不知道这种配方是不是也适用这样的新对旧的办法,不妨试试。

用在细胞学染色?要是为妇科细胞学,我觉得还是巴氏好。我们刚刚把HE改成巴氏,虽然染得不是很到位,但还觉得比HE清丽。

哎呀,其实染色我不在行,还是请行家们给些指点吧。我和楼主都很感谢!

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bb1982120 离线

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5 楼    发表于2007-03-01 16:04:00举报|引用
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 谢谢197老师的回复,过几天我们也试试使用改良Lillie-Mayers苏木素,不知你们觉得改良Lillie-Mayer’s苏木素与传统Haris苏木素在染色效果上有没有区别,哪个更好一点。

同意197的观点,我们都需要行家们的指导,不知各位老师能够解决我上面提出的问题。

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周祀侨 离线

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6 楼    发表于2007-03-01 16:06:00举报|引用
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 请楼主把配苏木素的方法写出来看看,大家一起找找原因。我觉得应该是配制环节有问题!
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197 离线

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7 楼    发表于2007-03-01 22:16:00举报|引用
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本帖最后由 于 2007-03-01 22:17:00 编辑  

改良Lillie-Mayers苏木素与传统Haris苏木素在染色效果上稍有不同,在我觉得是:改良Lillie-Mayers苏木素染色比较亮丽,但是似乎更容易使胞浆被苏木素着染;宫颈上皮粘液染色偏紫红;在宫颈涂片中,粘液处不容易污上苏木素颗粒;不出现氧化膜。

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ZXH887119 离线

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8 楼    发表于2007-03-02 06:55:00举报|引用
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 谢谢197
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bb1982120 离线

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9 楼    发表于2007-03-02 14:59:00举报|引用
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 谢谢周祀侨、197、ZXH887119老师的回复。

我们科室根据自己的实际情况换算后的苏木素配制成分为:苏木素:3.5g、硫酸铝钾:52.5g、无水乙醇:35ml、蒸馏水:700ml、氧化汞:1.75g、冰醋酸:35ml。

配制方法为:先用蒸馏水加热溶解硫酸铝钾,用无水乙醇溶解苏木素,然后倒入已溶解的硫酸铝钾水溶液中,煮沸1分钟。离火加入氧化汞,然后继续加热煮沸0.5-1分钟,(我们也试过不离火直接加氧化汞,效果同样不好)随即用自来水冲使染液迅速冷却,之后用纱布盖住瓶口,放于冰箱冷藏室过夜。次日过滤两次后加冰醋酸使用。

请各位看看我们的配制方法是否存在什么漏洞?

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197 离线

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10 楼    发表于2007-03-02 18:36:00举报|引用
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本帖最后由 于 2007-03-02 18:37:00 编辑

 我看技术规范的用量是这样的:

苏木精1克;
无水乙醇10毫升;
硫酸铝钾20克;
蒸馏水200毫升;
氧化汞0.5克;
冰醋酸8毫升。
     先用无水乙醇溶解苏木精,用蒸馏水加热溶解硫酸铝钾,然后将该两液混合并煮沸,加入氧化汞,继续加热和搅拌溶液至深紫色,随即用冰水冷却,恢复至室温后过滤备用。使用前加入冰醋酸并混匀、过滤。

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周祀侨 离线

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11 楼    发表于2007-03-05 20:27:00举报|引用
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放于冰箱冷藏室过夜"。不知道您那里为什么要冷藏过夜?我们都是放室温。不知道冷藏过夜的苏木素过滤后是否有泥沙样的沉淀?
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bb1982120 离线

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12 楼    发表于2007-03-06 16:25:00举报|引用
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 我认为主要是因为配制好的溶液要迅速冷却,当用流水冲至室温后,放入冷藏室以更好地中止氧化反应。不知这样对吗?

我科一直是这样地操作,冷藏过夜地苏木素过滤后会有泥沙样沉淀,但原来过滤地沉淀较少,最近出现加入氧化汞无反应后才发现过滤出地沉渣很多。我们以为是因为氧化汞氧化不全的缘故,不知与“冷藏”有关吗?

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bb1982120 离线

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13 楼    发表于2007-03-12 11:26:00举报|引用
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 我们前天按照197老师提供的规范的用量又重新配置了一次,可是仍然象以前一样,加入氧化汞的时候没有反应。
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197 离线

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14 楼    发表于2007-03-12 20:02:00举报|引用
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以下是引用bb1982120 在2007-3-12 11:26:00的发言:

 我们前天按照197老师提供的规范的用量又重新配置了一次,可是仍然象以前一样,加入氧化汞的时候没有反应。

会不会是哪种试剂失效了?
认真回忆一下,最近有没有更换哪一种试剂或新买什么试剂?或是哪种试剂太久了?
要不配另外一个配方看看。也许你没有另外一个配方的药品,那么寄出去买,很好买到的。
祝你顺利!
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zhangnl132 离线

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15 楼    发表于2010-05-17 20:14:00举报|引用
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 苏木素染液有氧化膜一层,很烦人,有没有什么办法去掉,谢谢给个建议

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zhangnl

水中央 离线

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16 楼    发表于2010-05-17 22:44:00举报|引用
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以下是引用zhangnl132在2010-5-17 20:14:00的发言:

 苏木素染液有氧化膜一层,很烦人,有没有什么办法去掉,谢谢给个建议

我们过去都是用纸刮除,内部的就是过滤了。
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刀锋上的蚂蚁

SOS991229 离线

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17 楼    发表于2010-06-06 22:56:00举报|引用
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 学到了。谢谢丁老师。
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baiyawei145 离线

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18 楼    发表于2008-10-18 20:04:00举报|引用
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 Gill改良苏木素液,我自己觉得染色时间长,我的就用的这个,比传统的比着太差,不知道怎么配才对,我想换一种
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dagouxiong 离线

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19 楼    发表于2008-08-09 08:51:00举报|引用
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 你煮的时间太长了
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赌具 离线

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20 楼    发表于2008-08-09 22:38:00举报|引用
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 学习了
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平凡一人, 风顺一帆, 平淡一生.
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