310．44
结直肠癌中胰岛素样生长因子结合蛋白-相关蛋白1表达上调与其5’CpG岛低甲基化的相关性= Hypomethylation of 5’ CpG island of insulin-like growth factor binding protein-related protein 1 is associated with its overexpression in colorectal cancer[刊，中]/林洁1，朱益民1，邵丽娜1，黄琼1，来茂德1（1.浙江大学医学院病理学与病理生理学系，杭州310058）//中华病理学杂志.―2008，37（8）.―512～516
为了探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-相关蛋白1（IGFBP-rP1）在结直肠癌中的表达改变并分析其与该基因5’CpG岛甲基化改变的关系。采用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测46例结直肠癌组织和配对的正常黏膜中IGFBP-rP1基因的表达水平及5’CpG岛的甲基化状况，并通过T-A克隆、测序加以验证。不表达IGFBP-rP1基因的结肠癌细胞系LoVo和SW620经去甲基化药物5-氮-2’-脱氧胞苷（5-aza-2’-deoxycytidine，5-aza-dC）处理后，分别用RT-PCR和MSP检测IGFBP-rP1表达改变和甲基化状况。结果：mRNA水平上，IGFBP-rP1在结直肠癌组织中的表达水平高于配对的正常黏膜（P<0.01）。在46例结直肠癌组织中，28例（60.9%）可检测到IGFBP-rP1基因5’CpG岛发生甲基化，而在配对的正常黏膜中，37例（80.4%）可检测到，二者差异有统计学意义（P<0.05）。IGFBP-rP1基因的表达和甲基化水平之间存在负相关（P<0.05）。5-aza-dC处理后，两株细胞均出现IGFBP-rP1基因的再表达，MSP法检测证实基因发生了去甲基化。结果提示，IGFBP-rP1基因的表达水平与5’CpG岛甲基化水平之间存在负相关。DNA甲基化是结直肠癌中IGFBP-rP1表达调控的一种机制。IGFBP-rP1低甲基化引起的基因表达上调可能与结直肠癌的发生发展有关。图5表1参18
关键词：结直肠肿瘤；胰岛素样生长因子结合蛋白质类；DNA甲基化；逆转录聚合酶链反应
来茂德：E-mail: lmd@zju.edu.cn
973项目子课题资助项目（2007CB914304）；国家自然科学基金资助项目(30570840，30770989)；高等学校博士学科点专项基金资助项目（20050335106）
310．44
胃癌及癌前病变的克隆性分析及其与Ki-67表达的相关性= Clonality and Ki-67 protein expression in gastric carcinoma and precancerous lesions[刊，中]/王磊1，郑莉1，王漱阳1，朱腾方1，朱虹光1，（1.复旦大学上海医学院病理学系 复旦大学生物医学研究院病理研究中心，上海200032）//中华病理学杂志.―2008，37（8）.―517～522
通过人雄激素受体基因位点克隆性分析技术对胃癌及其癌前病变进行克隆性分析，探讨胃癌发生发展过程中单克隆发生率的变化趋势及与Ki-67表达之间的关系及其意义。方法：肠型胃癌根治标本24例，胃镜活检标本150例。采用激光显微切割技术准确获取病变腺上皮细胞，基因组DNA经甲基化敏感的HpaⅡ限制性内切酶消化后，PCR扩增人雄激素受体基因，采用基因扫描技术对PCR产物进行分析。应用免疫组织化学二步法检测Ki-67在以上病变组织中的表达，并探讨其与克隆性分析结果的相关性。结果：单克隆发生率在胃黏膜肠上皮化生（15.63%，5/32）、低级别上皮内瘤变（22.22%，10/45）、高级别上皮内瘤变（69.44%，25/36）及肠型胃癌（100.0%，20/20）中逐渐增加，除胃黏膜肠上皮化生和低级别上皮内瘤变之间的差异没有统计学意义（P=0.47），其他各组之间差异均有统计学意义（P<0.01）。Ki-67的阳性表达率随着病变的发展而不断升高。低级别上皮内瘤变组织中单克隆病例的Ki-67的阳性表达率显著高于多克隆病例（P<0.01），且克隆性与Ki-67的阳性表达率之间存在显著相关性（P<0.01）。结果提示，单克隆的发生率及Ki-67的阳性表达率在胃癌发生发展过程中逐渐增加。且单克隆病变的发生与Ki-67的表达存在一定的相关性，两者的联合可用于胃癌的早期诊断及易感性的预测。图3表2参12
关键词：胃肿瘤；癌前病变；肿瘤干细胞测定；Ki-67抗原
朱虹光：E-mail: hongguang_701@shmu.edu.cn
310.44
间质细胞衍生因子1及其受体CXCR4在浸润性乳腺癌中的表达及其临床意义=
Significance of expression of stromal cell derived factor 1 and CXCR4 in invasive
breast cancer[刊，中]/刘芳芳1,位嘉1,郎荣刚1,范宇1,崔力方1,谷峰1,付丽1（1.天津医科大学附属肿瘤医院乳腺病理研究室 教育部乳腺癌防治重点实验室 天津市肿瘤防治重点实验室，天津 300060）//中华病理学杂志.—2008,37(8) . —529~536.
研究了间质细胞衍生因子1（SDF-1）及其受体CXCR4在浸润性乳腺癌中的表达，并分析其与浸润性乳腺癌相关临床病理指标及淋巴结转移之间的关系。采用免疫组织化学方法检测SDF-1/CXCR4在浸润性乳腺癌中的表达情况；采用地高辛标记的寡核苷酸探针进行原位杂交以检测趋化因子SDF-1在肿瘤环境中表达的部位及来源。 结果：（1）SDF-1主要表达于肿瘤细胞（胞质与胞膜）；SDF-1的胞质表达在淋巴结阳性组高于阴性组（P<0.05），且其表达程度与淋巴结受累数目、病理学分期、组织学分级、肿瘤大小及ER表达等指标呈正相关（P<0.05）；（2）罕见SDF-1 mRNA表达的脉管内皮却可见SDF-1蛋白的表达，其表达程度与瘤细胞质SDF-1着色正相关（P<0.01）；且淋巴管内皮SDF-1的着色与淋巴结转移程度为正相关（P<0.01）；血管内皮SDF-1的着色与肿瘤环境中的淋巴细胞浸润正相关（P<0.01），且同时伴有较多淋巴细胞浸润及SDF-1血管内皮着色阳性的病例，其淋巴结的转移程度分别高于仅有上述条件之一或二者均不具备的各组病例（P<0.05）；（3）CXCR4也主要表达于肿瘤细胞（胞质与胞核）；CXCR4的胞质表达在淋巴结阳性组高于阴性组（P<0.01），且其表达程度与淋巴结受累数目、病理学分期、组织学分级、肿瘤大小及HER2表达等呈正相关（P<0.05），而胞核的表达仅与PR的表达情况呈正相关（P<0.01）；（4）瘤细胞质CXCR4与SDF-1的表达呈正相关（P<0.01）。 结论：浸润性乳腺癌肿瘤细胞SDF-1和CXCR4的表达与多项临床病理指标，尤其是淋巴结转移率及转移程度有关，可作为预测乳腺癌淋巴结转移及预后的免疫病理学指标，同时应注意肿瘤微环境中SDF-1的多个来源及定位的不同意义。图12表3文献25
关键词：乳腺肿瘤；趋化因子，CXC；肿瘤转移
基金项目：国家自然科学基金资助项目（30470667）
付丽（E-mail:fulijb@hotmail.com）
310.44
霍奇金亚型Richter综合征免疫球蛋白重链可变区基因突变及克隆相关性分析= Clonality analysis and mutational status of IgVH gene in Hodgkin variant of Richter’s syndrome [刊，中]/ 毛峥嵘1，Andreas Rosenwald2，章锁江1，周韧1，Hans Konrad Mueller-Hermelink2（1.浙江大学医学院病理与病理生理学系，杭州310058；2. Pathology Institute, Wuerzburg University, Germany） //中华病理学杂志.—2008,37(8) . —523~528.
检测霍奇金（HL）亚型Richter综合征免疫球蛋白重链可变区（IgVH）基因重排、突变、克隆相关性等基因特征及其与预后的关系，初步探讨其可能涉及的分子机制。方法 用基因扫描分析HL亚型Richter综合征及慢性B淋巴细胞性白血病（B-CLL）伴CD30阳性R-S细胞样细胞病例IgVH基因的克隆性重排，测序分析IgVH基因的突变状态及其分子特征；用激光显微切割结合半套式PCR扩增R-S细胞和R-S细胞样细胞的IgVH基因，比较两种肿瘤成分的克隆相关性；用免疫组织化学检测两种肿瘤中zeta相关蛋白70(ZAP70)、p53、干扰素调节因子4（IRF-4）及EB病毒潜伏膜蛋白1（LMP1）等因子表达的不同。结果：（1）6例向HL转化及6例向R-S细胞样细胞转化的B-CLL患者中，携带突变型IgVH基因的患者各占5例；（2）4例IgVH基因克隆相关性分析中，与相应B-CLL克隆不相关的2例R-S细胞和1例R-S细胞样细胞均表达LMP1。而1例与B-CLL来自相同克隆的R-S细胞样细胞不表达LMP1；（3）HL亚型Richter综合征中B-CLL肿瘤细胞常使用的IgVH基因是VH3和VH4家族，6例中各有2例使用VH4-34和VH3-48基因。结论：（1）转化的HL和R-S细胞样细胞主要与生发中心或生发中心后的B-CLL有关，提示不同类型的Richter综合征可能涉及的发病机制不同；（2）HL与R-S细胞样细胞既可以是B-CLL克隆相关病例，也可以是克隆不相关的病例。而后者可能与B-CLL患者免疫抑制后继发EB病毒感染有关；（3）IgVH基因在HL亚型的Richter综合征B-CLL中的偏向性使用，提示抗原在转化中的作用。图6表3文献15
关键词:淋巴瘤；白血病，粒细胞，慢性；突变； 免疫表型分型， 基因重排，B淋巴细胞，重链
基金项目：国家自然科学基金资助项目（30770918）；国家留学基金委员会及德国Hanns-Seidel Stiftung基金资助项目(20033008)；浙江省自然科学基金资助项目（Y205292）
毛峥嵘（E-mail:maozr@zju.edu.cn）
310.44
利用比较基因组杂交技术分析横纹肌肉瘤中染色体基因组的变化特征＝Comparative genomic hybridization: the profile of chromosomal imbalances in rhabdomyosarcoma[刊，中]/李巧新,刘春霞,淳采璞,齐妍,常彬,农卫霞,姚恩生,李洪安,李锋(新疆石河子大学医学院病理教研室832002)//中华病理学杂志.－2008，37（8）.－536～541.
目的：探讨横纹肌肉瘤(RMS)基因组DNA的变化特征。方法：在一步法RT-PCR检测所有标本PAX3/PXA7-FKHR mRNA融合基因表达情况的基础上，应用比较基因组杂交(CGH) 技术分析25例原发性RMS患者，其中腺泡状横纹肌肉瘤(ARMS)10例，胚胎性横纹肌肉瘤(ERMS)12例，多形性横纹肌肉瘤(PRMS)3例。根据融合基因表达情况、组织学分型，临床分期，组织学分级，性别和年龄进行分组比较。同时收集RMS细胞株A204(腺泡型)、RD(胚胎型)作为对照。所有数据资料运用SPSS 13.0软件包分析。 结果：25例RMS CGH分析结果显示：（1）RMS中发生DNA拷贝数扩增最常见的部位是2p和12q，其他依次为6p、9q、10q、1p、2q、6q、8q、15q和18q（＞30%），发生DNA拷贝数丢失最常见的部位是3p、11p和6p（＞30%）。（2）ARMS扩增最常见的染色体臂是12q、2p、6、2q、4q、10q和15q（＞30%），缺失最常见的染色体臂是3p、6p、1q、5q（＞30%）；ERMS扩增最常见的染色体臂是7p、9q、2p、18q和1p、8q（＞30%），缺失最常见的染色体臂是11p。基因组变化在不同的组织学分类中差异无统计学意义(P＞0.05)。（3）伴有融合基因组扩增最常见的染色体臂是12q、2、6、10q、4q和15q（＞30%），缺失最常见的染色体臂是3p、6p、5q（＞30%）；不伴有融合基因组扩增最常见的染色体臂是2p、9q、18q（＞30%），基因组缺失最常见的染色体臂是11p和14q（＞30%）。12q扩增在这两组间的差异有统计学意义(P＜0.05)，并多见于伴有融合基因的RMS。（4）在临床分期分组中，9q扩增在Ⅱ期和Ⅲ～Ⅳ期间差异有统计学意义(P＜0.05)，且多见于Ⅱ期患者。 结论：（1）2p、12q、6p、9q、10q、1p、2q、6q、8q、15q、18q扩增及3p、11p、6p缺失可能与横纹肌肉瘤发病相关；（2）12q扩增可能与融合基因相关；9q DNA扩增可能与RMS发病早期有关。图3参19
关键词：横纹肌肉瘤；融合基因；比较基因组杂交
国家自然科学基金资助项目 （30560169）
E-mail: lifeng7855@yahoo.com.cn
310．44
转化生长因子β1与食管鳞癌上皮间质转化的关系= Transforming growth factor β1 regulation of epithelial- mesenchymal transition in esophagus squamous cell carcinoma[刊，中]/孙洋1，李珊珊1，王新华1，王小军1，阎爱华2（1.郑州大学第一附属医院病理科 河南省肿瘤病理重点实验室，郑州450052；2. 郑州大学基础医学院癌前研究室，郑州450052）//中华病理学杂志.―2008，37（8）.―542～548
为了探讨食管鳞癌中转化生长因子β1（TGFβ1）与上皮间质转化的关系以及阻断TGFβ1通路对食管鳞癌上皮间质转化的影响。将化学合成的TGFβ1反义寡核苷酸（TGFβ1-ASODN）转染食管鳞癌细胞株EC9706，采用RT-PCR、免疫细胞化学及流式细胞术检测阻断前后对TGFβ1活性的影响以及对上皮性标志物E-cadherin及间质性标志物波形蛋白表达的影响；观察TGFβ1-ASODN转染后细胞形态学的变化；采用细胞划痕试验检测TGFβ1-ASODN转染前后细胞迁移能力的变化。结果：转染TGFβ1-ASODN可有效的抑制EC9706细胞中TGFβ1的活性，其mRNA（0.25±0.07）及蛋白（35.07%±1.42%）的表达均明显低于转染前mRNA（0.43±0.09）及蛋白（43.57%±1.77%）的水平（P<0.05)；并提高E-cadherin的表达，抑制波形蛋白的表达。转染后E-cadherin mRNA（0.38±0.09）及蛋白（17.13%±1.45%）的表达明显高于转染前mRNA（0.22±0.06）及蛋白（12.53%±1.31%）的水平(P<0.05)；波形蛋白mRNA（0.73±0.07）及蛋白（14.15%±1.46%）的表达低于转染前mRNA（0.89±0.09）及蛋白（17.97%±1.42%）水平(P<0.05)。TGFβ1-ASODN转染可明显抑制细胞的运动能力，转染后细胞迁移距离（0.45±0.05）比转染前（0.81±0.11）明显缩小(P<0.05)。结果提示，TGFβ1可能参与了食管鳞癌的上皮间质转化，TGFβ1-ASODN可导致食管鳞癌细胞上皮性标志物E-cadherin表达上调、间质性标志物波形蛋白表达下调、形态发生改变以及细胞移动能力降低，阻断TGFβ1信号可抑制食管鳞癌细胞的上皮间质转化。图8表7参9
关键词：食管肿瘤；转化生长因子β1；转化，遗传
李珊珊：E-mail:lsspath@yahoo.com.cn
河南省重点科技攻关项目（072102310042）
