请老师帮分析一下哪个环节出问题了

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请老师帮分析一下哪个环节出问题了

dani 离线: 帖子：45; 粉蓝豆：41; 经验：138; 注册时间：2011-09-09; 加关注 | 发消息

楼主发表于 2015-12-09 12:36|举报|关注(0)
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大鼠肝脏
大鼠肝脏

组织来源：大鼠肝脏

脱水：1缸甲醛 3h

2缸 75%酒精 2h

3缸 85%酒精 2h

4缸 95%酒精 1.5h

5缸 95%酒精 1.5h

6缸 100%酒精 1.5h

7缸 100%酒精 1.5h

8缸二甲苯 45分

9缸二甲苯 45分

10缸石蜡 0.5h

11缸石蜡 2h

反复做都是这样的结果，切片时没放冰里，很难切，碎碎的，染片时掉片严重

请各位老师赐教，是哪个环节出问题了

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: 顺其自然

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寻找生命的奇迹离线: 帖子：326; 粉蓝豆：320; 经验：1843; 注册时间：2011-09-17; 加关注 | 发消息

5 楼发表于2015-12-22 23:18:20举报|引用
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组织脱水、透明和浸蜡对于组织切片都有一定影响，组织脱水、透明和浸蜡过度，组织块变硬变脆，特别是对于肝组织，硬化过度使组织易碎，不易切出好的片子。建议：

1、6缸 100%酒精 40min； 7缸 100%酒精 40min； 8缸二甲苯 30min； 9缸二甲苯 30min； 10缸石蜡 40min； 11缸石蜡 1h

2、切片时先初修片，修好的片子放在冰水（冰水混合）中，切片尽量用新刀口，将切好的片子先放入冰蒸馏水中展片，后再放入40-50℃温水中展片。

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: 狭路相逢，勇者胜

dani 离线: 帖子：45; 粉蓝豆：41; 经验：138; 注册时间：2011-09-09; 加关注 | 发消息

4 楼发表于2015-12-11 10:38:30举报|引用
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浸蜡温度我不太清楚，我们那个机器没有温度调节的开机加热石蜡，一直融掉为止。取材差不多一元硬币大小，比硬币稍厚一些。

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501699385: 取材后固定下再上机，浸蜡的温度可以用温度计测测看多少，不能太高，60左右就好，不要超过65。还有脱水过程中试剂有没有摆放错？要确保试剂没有搞混搞错。

2015-12-11 13:14

我来说一句

: 顺其自然

深山老林离线: 帖子：161; 粉蓝豆：56; 经验：471; 注册时间：2008-08-30; 加关注 | 发消息

3 楼发表于2015-12-10 22:08:45举报|引用
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组织来源：大鼠肝脏脱水：1缸甲醛 3h； 2缸 75%酒精 1h； 3缸 85%酒精 1h； 4缸 95%酒精 40min； 5缸 95%酒精 40min； 6缸 100%酒精 40min； 7缸 100%酒精 40min； 8缸二甲苯 30min； 9缸二甲苯 30min； 10缸石蜡 40min； 11缸石蜡 1h 可以试试这个程序，大鼠肝脏相对还是比较小，应该按小标本来处理，安大标本处理会处理过。