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请老师帮分析一下哪个环节出问题了

dani 离线

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楼主 发表于 2015-12-09 12:36|举报|关注(0)
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  • 请老师帮分析一下哪个环节出问题了图1
    大鼠肝脏
  • 请老师帮分析一下哪个环节出问题了图2
    大鼠肝脏

 组织来源:大鼠肝脏

脱水:1缸   甲醛  3h

            2缸  75%酒精 2h

            3缸   85%酒精 2h

            4缸    95%酒精 1.5h

            5缸     95%酒精 1.5h

            6缸    100%酒精 1.5h

            7缸     100%酒精  1.5h

            8缸     二甲苯        45分

            9缸     二甲苯         45分

           10缸     石蜡           0.5h

            11缸    石蜡            2h

反复做都是这样的结果,切片时没放冰里,很难切,碎碎的,染片时掉片严重

请各位老师赐教,是哪个环节出问题了

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501699385 离线

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1 楼    发表于2015-12-09 18:43:07举报|引用
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看你写的程序好像没什么问题,浸蜡的温度是多少?

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  • 501699385:  取材的情况是什么样的?多大多厚?
    2015-12-10 16:28
  • dani:  浸蜡温度我不太清楚,我们那个机器没有温度调节的开机加热石蜡,一直融掉为止。取材差不多一元硬币大小,比硬币稍厚一些。
    2015-12-11 10:41

忙碌土拨鼠 离线

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2 楼    发表于2015-12-09 19:01:19举报|引用
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 二甲苯时间稍长

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深山老林 离线

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3 楼    发表于2015-12-10 22:08:45举报|引用
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组织来源:大鼠肝脏 脱水:1缸 甲醛 3h; 2缸 75%酒精 1h; 3缸 85%酒精 1h; 4缸 95%酒精 40min; 5缸 95%酒精 40min; 6缸 100%酒精 40min; 7缸 100%酒精 40min; 8缸 二甲苯 30min; 9缸 二甲苯 30min; 10缸 石蜡 40min; 11缸 石蜡 1h 可以试试这个程序,大鼠肝脏相对还是比较小,应该按小标本来处理,安大标本处理会处理过。
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  • dani:  谢谢老师指教,我试试
    2015-12-11 10:41
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以己之有限的力量,为无限的事业做一点点微不足道的事。

dani 离线

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4 楼    发表于2015-12-11 10:38:30举报|引用
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浸蜡温度我不太清楚,我们那个机器没有温度调节的开机加热石蜡,一直融掉为止。取材差不多一元硬币大小,比硬币稍厚一些。

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  • 501699385:  取材后固定下再上机,浸蜡的温度可以用温度计测测 看多少,不能太高,60左右就好,不要超过65。还有脱水过程中试剂有没有摆放错?要确保试剂没有搞混搞错。
    2015-12-11 13:14
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顺其自然

寻找生命的奇迹 离线

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5 楼    发表于2015-12-22 23:18:20举报|引用
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 组织脱水、透明和浸蜡对于组织切片都有一定影响,组织脱水、透明和浸蜡过度,组织块变硬变脆,特别是对于肝组织,硬化过度使组织易碎,不易切出好的片子。建议:

1、6缸 100%酒精 40min; 7缸 100%酒精 40min; 8缸 二甲苯 30min; 9缸 二甲苯 30min; 10缸 石蜡 40min; 11缸 石蜡 1h 

2、切片时先初修片,修好的片子放在冰水(冰水混合),切片尽量用新刀口,将切好的片子先放入冰蒸馏水中展片,后再放入40-50℃温水中展片。

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狭路相逢,勇者胜
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