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请问大家一般配置的苏木素的PH值是多少?有没有测过?我测过我们的是二点多,看了几篇文章上面写的大都是一点多,二点多。
Ehrlich苏木精染液pH值变化对组织染色的影响
pH值测定在量化评价苏木精染液染色力中的初步应用
那么问题来了,病理学技术和病理技术考试书上写的,染色体的PI是3.3—3.6,染色体的环境的PH值为7.5—7.8,细胞浆的PI是4.7—5.0,胞浆的PH为6.7—6.8
染色的最佳PH为3.6—4.7,如果按书上写的,如果苏木素染液的PH低于3.3了,染色时,环境PH变低,低于他的等电点,那么染色体应该呈碱式电离,带正电,应该不易与苏木素结合才对啊?虽然染色是有很多影响因素的,但是这些化学作用应该是最重要的吧?先染苏木素可以不用考虑胞浆的着色,那就应该PH大于3.6才对啊?
就是不知道苏木素配置后的最佳PH是多少?好像目前没看到有书上介绍过,只看到丁老师的书上说过伊红的最佳PH是3.6—3.8.
不知道下面那图的说法是不是有一定的影响因素?
这个问题想了很久没想明白?希望有老师来解答?
我书上有写:苏木素染液pH值2.8-3.2
采用常规使用的改良Lillie—Mayer苏木精染液,具体配制方法如下:苏木精5 g溶于50 ml无水乙醇,50 g硫酸铝钾充分溶于650 ml蒸馏水后与苏木精无水乙醇液充分混合,加入500 mg碘酸钠,最后加入甘油300 ml和冰醋酸20 ml,室温静置1周后备用。不同批次的实验结果显示,苏木精染液染pH值1.5~1.8间变化。
苏木精染液配制过程中加入醋酸主要是调节染液pH值,当pH值处于合适范围时,不仅可以抵消氧化剂的过度氧化、促进氧化苏木精(即苏木红)与铝盐结合形成蓝色色淀、还可维持细胞核呈酸式电离,增强细胞核的选择性着色,减少苏木精沉渣与氧化膜的形成,所以建议加醋酸。
我也一直有这个疑问,想了好久没有找到满意答案,你找到满意答案了吗?我用PH计测了下苏木素PH,大约2.6.
关于你的配图说明,我想首先要搞清楚染色时细胞核内的DNA环境到底是本身的7.5-7.8PH环境还是苏木素提供的强酸2.6PH环境,前者似乎可以解答,但会有疑问为什么大分子的苏木素染色基团可以进去,而H+却进不去?后者就是你我的疑问,电荷理论是不能解释的,由此是否可以推测还有其它更重要的染色机制?
希望看到你的回复。
通过Al+++氧化苏木素与DNA磷酸结合进行螯合反应;对于H+为何进不去,主要是媒染剂多为过渡金属元素,一至三价的可溶性盐类,或氢氧化物,如铝盐、铁盐及金属含氧酸等。在这些金属离子或原子的最外层和次外都有电子的空轨道,可以接受其他物质分子或离子中某些原子团中电负性较大的元素的原子提供的孤对电子形成配价键而络合。
yangli02020 离线
现实中,我们一般配制的苏木素染液确实都是2.6左右,而目前国外市售的苏木素染液ph也大多为2.5。解释如下:
1、细胞浆的主要成分蛋白质等电点ph4.7~5.0,若苏木素染液的ph大于细胞浆的等电点时,胞浆会表现为酸性电离而带负电荷,就会使苏木素染液的正电荷不仅与细胞核的负电荷结合染色,也与胞浆因为其酸性电离而带的负电荷染色结合,以致于造成细胞核与细胞浆的染色难以区分,所以苏木素的ph必然要低于4.7的。