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口腔黏膜细胞制片方法实验
1 目的:比较直接涂片与液基制片的细胞数
2 方法: ①使用口腔刷刷取正常人口腔双颊黏膜细胞,分别做直接涂片和置入细胞保存液做液基制片。
②分为两组:前5人为一组,左颊粘膜细胞进行涂片,右颊粘膜细胞进行液基;后5人为一组,方法相反。
③取材时,口腔刷同一方向旋转十五圈。
④由同一操作人进行取材。
⑤操作人取材后将需要涂片的口腔刷在玻片的扫描区域上旋转3圈,将需要做液基的口腔刷在细胞保存液中涮洗十五圈后剪下刷头,置于细胞保存液中。
⑥固定时间:涂片在95%乙醇中固定15min后,取出,备染色。液基固定15min后,进行离心,使用TXD3细胞涂片离心机进行制片,备染色。
⑦同时进行DNA染色(Feulgen染色)。
⑧使用DNA倍体分析仪进行扫描计数。(DNA倍体分析仪采用二代I型机器,并确保扫描区域内的704个视野全部进行扫描计数。)
3 数据统计:见附表
4 结论:脸颊部位取材,液基制片方法与涂片方法比较细胞数未见明显差异;
舌缘部位取材,液基制片方法与涂片方法比较细胞数明显高于涂片法。