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xkj2797xkj 离线
谢谢各位老师,片子一直是湿封的,最近稀释了树胶,片子好多了。
没有从根本上解决问题,稀释了树胶,只是加多了二甲苯,起到一定的透明效果,但也带来了隐患,以后等二甲苯挥发完后,就会出现很多空洞。所以应该在封片时,少拿出几张片子封,如果封片速度不快,建议拿2-3张片子出来封,封好后再拿。这样就不会有这种现象再出现。
我觉得这个问题即所谓的“咖啡豆”不是在脱水机上,而是在切片后脱蜡烛、染色再至脱水至封片的各种试剂上,出现此现象最关键的是染色后的脱水剂,根据我们的经验在伊红缸后的各种试剂顺是用80%、80%、95%、95%、无水乙醇(3个)松节油(2)二甲苯,毎个缸中液面必须超过玻片的高度,以免由于液面过低而至浓度低的酒精内的水份带至后面缸内,在操作过程中顺次速度不易过快,主要看玻片上不挂水珠了很顺,光亮才可移至下一缸。另外切片组织要平整、薄(5微米)。你那个胃镜组织没有此现象,而肌瘤组织有,可能是后者切片较厚,水份容易附着,所以就会引起咖啡豆,以上建议仅供参考。
savant0196 离线
图片情况及描述来看,因切片厚薄和细胞着色没有什么问题,所以排除切片或者脱水因素,因该黑点比较透亮,而杂质是不会透亮的,所以也不是由于水质问题,如果脱蜡不净的话,主要出现核不着色或模糊的情况,推测主要在于染色后脱水与封片,这个过程往往就是气泡与水滴,气泡的表现主要是圆形,细小水滴是不规则形,因你加稀释树胶之后情况有所改善,主要考虑是片子上有水滴引起的。因春季多数地方比较潮湿,容易出现这种现象,建议在最后一缸二甲苯中加入少量石碳酸,如果其中有较多水分的话,就会显示红色。多注意更换试剂,在封片时每拿一张片就封一张,看这样操作之后是否能够改善一些。
lgq501362390 离线