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求助-关于免疫组化组织碱修复出现褶皱的问题

呼延雪青 离线

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楼主 发表于 2011-12-16 14:52|举报|关注(0)
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求助-关于免疫组化组织碱修复出现褶皱的问题图1
名称:扁桃体组织、Bcl-6 EDTA修复
描述:Bcl-6 EDTA修复.png
求助-关于免疫组化组织碱修复出现褶皱的问题图2
名称:扁桃体组织、Bcl-6 柠檬酸修复
描述:Bcl-6 柠檬酸修复.png
求助-关于免疫组化组织碱修复出现褶皱的问题图3
名称:图1
描述:MUM1;EDTA修复-扁桃体.png
求助-关于免疫组化组织碱修复出现褶皱的问题图4
名称:图2
描述:MUM1;柠檬酸修复-扁桃体.png
 
我最近做免疫组化的实验,出现这种情况,如上图。
玻片是用多聚赖氨酸涂制的,操作流程如下:
1.蜡块组织切片、片厚3微米。脱蜡水化后抗原修复,采用高温高压修复法。
2.修复之后进行过氧化氢封闭,10min。
3.一抗,30min。pbs冲洗。
4.二抗两步法,各十分钟,每步结束后均用pbs冲洗。
5.染色3min,染色结束后置于蒸馏水中终止反应,置苏木素复染3min。
6.95%乙醇,无水乙醇各2min,吹干。
7.二甲苯透明,三次各5min,中性树脂封片。
镜下看到EDTA修复出的片子有褶皱,柠檬酸的片子却没有,不知为何?其他的扁桃体的EDTA修复也有类似现象。
标签:免疫组化 褶皱 组织修复
本帖最后由 呼延雪青 于 2011-12-27 10:03:51 编辑
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