写点自己遇到的问题

冰冻切片离开冰冻机后的处理

      1、 有很多医院（我在这边去过的）在做冰冻切片时，组织切完粘片后，只经95%乙醇固定数十秒后进入常规HE染色。染色效果，细胞核偏白，有种深秋早晨阳光未能驱散晨雾的感觉。

      2、也有医院组织切完粘片后，用AF固定液固定数十秒后常规HE染色。染色效果自己感觉和经95%乙醇固定的似乎差别不大。

      3、我们医院用组织切完粘片后，用的是AAF固定液，固定时间将近1分钟。因为固定液里加入了少量醋酸，对核蛋白固定效果稍微好了一些，但效果感觉应该还能再好。

      4、最近在一篇陈杰老师的文章上看到，他们的方法：组织切完粘片后，用酒精灯稍微加热（60°左右）手感觉到温度即可，然后放入二甲苯中脱脂2-3下，随后放入梯度酒精脱笨，后入水经HE常规染色。看到他们甲状腺的染色图片感觉还不错，就是有点“肚子”。不知道大家谁用过这种办法？

     5、自己感觉：可以把3和4结合，尽量取消“肚子”现象。大家有时间可以试试。

由于我们以前是做快速石蜡，冰冻开展时间不长，希望大家多放点经书。感觉不尽！

终于有看到和我们医院一样的了，我们就是和陈杰老师做法一样的，先前看到很多文章都说要固定我还纳闷着呢？顺便请教下老师什么叫做“肚子”现象啊？

我们的方法是：切完贴片后用“无水甲醇”固定30“，再用“75%乙醇”固定30“，入水洗30”，再染苏木素30“，水洗、0.5%氨水2”，水洗、伊红10“，再一次脱水透明封片，效果较好。

染色效果细胞核偏白，有种深秋早晨阳光未能驱散晨雾的感觉的真正原因：不是固定液问题，而是未快速固定，细胞退变的原因。同样，加热也会引起细胞退变。