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老师好!以前学生也遇到过此情况,偶尔染出的片子的细胞核的上方会出现黑色的异物,多见于子宫平滑肌瘤的片子。很影响观察核的形态、核分裂像。初以为是苏木素杂质,而且不经常出现,所以没在意。最近此现象很严重,许多的片子都出现此情况,反复过滤苏木素不见好转,新配苏木素也是如此。经过仔细观察,现发现似乎不是杂质,是细胞核上方覆盖着小气泡(如图),不知何故,如何解决??另外一个问题,我们的片子封片后经常出现斑片状或整张片子模糊,似乎树胶没有封到(如图),不只是脱蜡不干净,还是脱水出问题?此想象并不是出现在所有的一批片子上,而是个别。请老师们帮助指点。谢谢。
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因为不知道你的脱水、染色程序,所以,只能推测性的回答你的问题了(如有不对的的地方,请指教)。细胞核的上方会出现黑色的异物从第图5、6、7、8、9中可以中看的很清楚,看着不像是苏木素结晶,从平滑肌细胞核上看着有的细胞有些像苏木素深染了(有几个细胞核染的类似图5、6、7、8、9中的,这几个肯定不是深染),是有什么东西覆盖在细胞核上,我觉得应该是苏木素-伊红以后的问题(封片过程中脱水透明不彻底造成的,如果是干封,酒精中的水分带带二甲苯中,透明后,吹干在封片后,有可能出现这种情况,湿封也是一样,封片后,玻片的组织上出现小的水泡,可能出现这种情况。你试试把脱水透明的无水酒精和二甲苯换了看看);封片后经常出现斑片状或整张片子模糊,似乎树胶没有封到,从图10来看很明显是我刚才提到的,是脱水不好(无水酒精不纯,而把水份带到二甲苯中),封片后就出现这种情况了(这个不是气泡),后面的图13、14怎么看着像没封片一样(应该不会是胶的问题吧?)你先换换酒精和二甲苯试试!
(本观点纯属本人意见!仅供参考!本人微信:13759416387)
原因:细胞核为黑色,是因为显微镜光源的光线未能顺利穿过细胞核或是期间发生了折射引起了细胞核发黑。
分析:经过仔细观看你发上的图片,几乎可以肯定细胞核内地物质为水。因为如果是气泡折光不会如此严重,会出现类似同心圆的黑泡,而水是几乎光线很难穿过除非大的水泡,所有我认定主要凶手为组织脱水不彻底或切片从无水里取出暴露在空气中时间较长引起了潮化。
解决:更换脱水酒精,切忌封片前不要在空气中暴露时间过长,不然你就是全用无水脱也无济于事。
总结:楼主如果按规定步骤走,按规定更换脱水液,还出现这种情况,就说明技术室湿度过大,封片一定要及时!呵呵 楼上不会是南方人吧,这种情况南方多见!
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