在病理制片中用TO代替二甲苯的的体会

   因为现在的单位在病理制片中，一直用TO代替二甲苯制片，所以我也只有继续接着用TO。最初抱着怀疑的态度来看待这种试剂。经过大半年的使用和观察，发觉TO确实优点不少，特此介绍一下我的体会。
   在脱水透明浸蜡这一步里，经酒精梯度脱水，用TO透明，然后浸蜡。在切片时感觉和二甲苯做透明剂没有区别，组织没有发硬变脆的感觉。我们的蜡块，提供给上级医院做免疫组化，病人返回过一例淋巴瘤的免疫组化片子，片子非常漂亮，既薄也没有刀痕。如果我们的蜡块不好，上级医院也切不出这样的片子的。
    在第一次用TO做为脱蜡剂染切片时，看见经过最后一步80%的酒精，水洗后玻片上有略浑浊的水滴时，好像和二甲苯时这一步的透明不同，我担心染色效果不佳，但是片子出来后，染色效果完全没有影响。解决上述问题，其实也简单，就是注意及时更换TO后的各步酒精，保持酒精应该有的浓度，彻底洗去TO，水洗时玻片便可以变得清澈透明。
    封片前，TO也可以在无水酒精后使用，我们用的3缸，每缸2-3分钟即可。采取湿封法，片子没有干封那样的微小气泡。虽然也有气味，但是气味较小，是松节油的那种气味。
    二甲苯是苯类试剂，是有毒的，解决办法要么就是采取隔离操作，要么就是加强通风换气。
    TO试剂瓶签上介绍无毒。不知道有没有可靠的资料，证明它也是有毒的？如果确实没有毒，或者毒性小于二甲苯，我觉得还是值得用TO代替二甲苯的。

首先谢谢楼主的热心与专业，为广大同仁们提供了一种很好的脱蜡透明试剂，再次我所在单位曾用过TO，也发表下自己的拙见。

A.优点

1、比二甲苯更环保无毒一些，没有那么大的刺激性气味。

2、用于脱蜡透明效果不错，能满足日常需要。

B.缺点

1、脱蜡透明时间比二甲苯长，尤其是在秋冬季节室温较低的情况下（南方可能会好点）。

2、制片后镜下阅片认为效果没有二甲苯好，但是对于健康而言，可以考虑。

C.讨论

因为TO好像没有所谓的什么认证，我们单位已经不能用这种试剂了，不知道有没有类似的同行有次经历？

有那么多好的二甲苯替代液不用，用什么松节油？想具体了解二甲苯替代物的精确使用情况，可参考席越编著的《骨组织病理解剖学技术》一书，其中祥细介绍了全套环保制片技术（包括甲醛替代物、二甲苯替代物，二甲苯溶胶替代物），及其在所有特殊组织当中的使用。

谢谢版主点评。

我在使用中，觉得脱水机中酒精脱水后，TO透明还是不错的，就是时间要长点，我是3缸共3个小时。最后封片时，切片经过纯酒精后再用3缸TO透明，进行湿封。制出来的切片效果自己觉得似乎还不错。外出会诊还没有反应切片质量有什么大的问题，网上发帖，切片的图片好像也还可以吧？

至于TO的认证还没有注意到这个问题，好像还没有人说这件事，今后留心看怎么回事。

最近兄弟单位在用环保型绿色透明试剂，无色无味，据说制片效果不错，留心中。

二甲苯用的时间最长，现在许多单位也在用。TO用的单位也有，时间也有几十年了。都有毒副作用，其毒副作用的大小大家都是清楚的。

搞病理的都希望有更好的福尔马林和透明剂的替代用品，制备的片子既好，也完全没有毒副作用。但是究竟好不好，也还要靠时间来验证，比如B超，虽然用于临床已经40余年了，究竟对人体有无副作用，至今还在观察中，特别是对胎儿和眼球等敏感组织，都特别注意照射的时间。新型试剂的使用，有的单位走在了前面，希望你们客观的介绍这些试剂，效果如何，成分如何，毒副作用如何？后来的单位会感谢你们的。