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- 在病理制片中用TO代替二甲苯的的体会
在病理制片中用TO代替二甲苯的的体会
因为现在的单位在病理制片中，一直用TO代替二甲苯制片，所以我也只有继续接着用TO。最初抱着怀疑的态度来看待这种试剂。经过大半年的使用和观察，发觉TO确实优点不少，特此介绍一下我的体会。
在脱水透明浸蜡这一步里，经酒精梯度脱水，用TO透明，然后浸蜡。在切片时感觉和二甲苯做透明剂没有区别，组织没有发硬变脆的感觉。我们的蜡块，提供给上级医院做免疫组化，病人返回过一例淋巴瘤的免疫组化片子，片子非常漂亮，既薄也没有刀痕。如果我们的蜡块不好，上级医院也切不出这样的片子的。
在第一次用TO做为脱蜡剂染切片时，看见经过最后一步80%的酒精，水洗后玻片上有略浑浊的水滴时，好像和二甲苯时这一步的透明不同，我担心染色效果不佳，但是片子出来后，染色效果完全没有影响。解决上述问题，其实也简单，就是注意及时更换TO后的各步酒精，保持酒精应该有的浓度，彻底洗去TO，水洗时玻片便可以变得清澈透明。
封片前，TO也可以在无水酒精后使用，我们用的3缸，每缸2-3分钟即可。采取湿封法，片子没有干封那样的微小气泡。虽然也有气味，但是气味较小，是松节油的那种气味。
二甲苯是苯类试剂，是有毒的，解决办法要么就是采取隔离操作，要么就是加强通风换气。
TO试剂瓶签上介绍无毒。不知道有没有可靠的资料，证明它也是有毒的？如果确实没有毒，或者毒性小于二甲苯，我觉得还是值得用TO代替二甲苯的。
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本帖最后由 Danrs 于 2013-05-03 18:14:42 编辑
谢谢版主点评。
我在使用中，觉得脱水机中酒精脱水后，TO透明还是不错的，就是时间要长点，我是3缸共3个小时。最后封片时，切片经过纯酒精后再用3缸TO透明，进行湿封。制出来的切片效果自己觉得似乎还不错。外出会诊还没有反应切片质量有什么大的问题，网上发帖，切片的图片好像也还可以吧？
至于TO的认证还没有注意到这个问题，好像还没有人说这件事，今后留心看怎么回事。
最近兄弟单位在用环保型绿色透明试剂，无色无味，据说制片效果不错，留心中。
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二甲苯有一个毒副作用，就是可能会导致一些人粒细胞减少，这是大家公认的。二甲苯虽然不会直接致癌症，但是免疫力下降，却是间接致癌的一个因素。似乎松节油（TO）没有看到有这个作用。
话又说回来，现在在制片的过程中，实际上，有条件的医院，技术员接触二甲苯的机会已经微乎其微了。自动脱水机、自动染片机、自动封片机。许多过去直接接触二甲苯的工序，已经由机器代替了。现在随着医院条件的改善，加强通风的问题，也是很容易解决的，而且这也是最简单有效的减少毒副作用的办法，这一点，对应对TO的毒副作用，也是有效的。
和现在病理科的条件比，过去的条件更简陋。病理人，也是这样走过来的。只要注意防范，有些问题完全是可以避免的。大可不必像害怕瘟疫一样，谈二甲苯色变，躲的远远的。须知量变才会导致质变，没有一定的量的积累，也不会导致身体的改变的。就像放射线和辐射可以致病一样，实际上人体天天在接触这些东西。
同意丁伟老师的意见，现在有的厂商利用大家恐惧二甲苯的心理，推出许多替代品，实际上，价高，制片效果不好，而且有没有毒副作用，只有天晓得，大家倒是应该多长个心眼，免得成了试验品。
冬天天冷最好染色开始的脱蜡用二甲苯，温度对二甲苯脱蜡的影响没有TO的明显。脱蜡换缸的时间短，二甲苯挥发在空气中的量应该不大。
TO时间用久了，染缸周围容易有黄色的粘稠的糊状物，但是用蘸有酒精的棉球很容易将其除去。
原来我还以为只有我们才在用TO，后来听给我们供货的商家说，附近几家大型医院也在用TO。看来，用TO的医院也并不少，只是很少看到有人谈谈自己的体会。
国内还有那些品牌的TO我不知道，进货是科室主任。我们现在用的是广西芩溪市松香厂的。
过去的价是32元一瓶（500ml），商家说，最近涨价了，38元一瓶了。二甲苯好像是12-16元一瓶。贵一倍多，不过，我觉得还是值得的。
网上能查到的TO的毒副作用，两个极端，一说无毒，一说，毒性也不小。不知道那些长期使用TO的医院，这方面有什么体会。如果主要是空气吸入，那也是可以用换气扇来稀释的。
当然还有一个问题，我同样关心，TO对病理切片的质量还有那些不好的影响？
关于TO中华病理技术网上曾经讨论过，shanghainese 版主发的那个帖，主要是讨论的TO 的毒副作用。
发表于 2005-11-23 01:04 [讨论]松节油(Turpentine oil)的毒性
[这个贴子最后由shanghainese在 2005/11/23 11:46pm 第 2 次编辑]
松节油. 产品英文名, Turpentine oil.
一、健康危害
侵入途径：吸入、食入、经皮吸收。
健康危害：对皮肤粘膜有刺激作用，对中枢神经有一定的麻醉作用及膀胱刺激作用。急性中毒：引起眼及上呼吸道粘膜刺激症状：流泪、咳嗽等；高浓度蒸气可引起麻醉作用，出现平衡失调及四肢痉挛性抽搐、流涎、头痛、眩晕，可引起膀胱炎，有时有肾损害。慢性影响：长期接触可发生呼吸道刺激症状及乏力、嗜睡、头痛、眩晕、食欲减退等。对皮肤既是原发性刺激物，引起脱脂、干燥、发红等，又可引起过敏性皮炎。
二、毒理学资料及环境行为
急性毒性：LD505760mg/kg(大鼠经口)；LC5012000mg/m3 6小时(大鼠吸入)；29000mg/m3,2小时(小鼠吸入)；人吸入4.2～5.57g/m3，眼刺激流泪、头痛、恶心；人经口150ml，致死；人经皮0.001%，皮肤接触后干燥、发红、干裂等。
亚急性和慢性毒性：小鼠经皮240g/kg×20周，最小中毒浓度。
危险特性：其蒸气与空气形成爆炸性混合物，遇明火、高热能引起燃烧爆炸。与氧化剂能发生强烈反应。若遇高热，容器内压增大，有开裂和爆炸的危险。
燃烧(分解)产物：一氧化碳、二氧化碳。
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◎松節油 Turpentine oil
臨床症狀︰症狀為腹部灼燒感、嘔心、嘔吐、腹瀉、小便困難、血尿、意識不清、淺呼吸、 驚厥。
口服︰15mg的揮發油如松節油就可以造成死亡。
吸入︰造成眩暈，快而淺的呼吸、心跳加快、支氣管刺激、意識不清或痙攣。
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【毒性及燃爆性】刺激眼睛、鼻、咽喉；吸入浓度过高，引起头痛、头昏、恶心、精神错乱、脉搏加速、损伤肾功能、肌肉抽搐，甚至死亡；接触会灼伤眼睛，致皮肤过敏，产生湿疹。
本品易燃，容器在火中爆炸，爆炸下限：0.8%。
【个人防护】严禁烟火；穿防护服，避免皮肤接触；戴护目镜，避免眼接触；选用适当的呼吸器。
我的看法是，TO也是有毒的，只是相形之下，我还是觉得TO毒副作用比二甲苯小些。以上情况都是浓度比较高的情况下发生的，实际工作中，我们接触的环境浓度远远小于上面那些情况。
发表于 2005-11-23 01:04 [讨论]松节油(Turpentine oil)的毒性
[这个贴子最后由shanghainese在 2005/11/23 11:46pm 第 2 次编辑]
松节油. 产品英文名, Turpentine oil.
一、健康危害
侵入途径：吸入、食入、经皮吸收。
健康危害：对皮肤粘膜有刺激作用，对中枢神经有一定的麻醉作用及膀胱刺激作用。急性中毒：引起眼及上呼吸道粘膜刺激症状：流泪、咳嗽等；高浓度蒸气可引起麻醉作用，出现平衡失调及四肢痉挛性抽搐、流涎、头痛、眩晕，可引起膀胱炎，有时有肾损害。慢性影响：长期接触可发生呼吸道刺激症状及乏力、嗜睡、头痛、眩晕、食欲减退等。对皮肤既是原发性刺激物，引起脱脂、干燥、发红等，又可引起过敏性皮炎。
二、毒理学资料及环境行为
急性毒性：LD505760mg/kg(大鼠经口)；LC5012000mg/m3 6小时(大鼠吸入)；29000mg/m3,2小时(小鼠吸入)；人吸入4.2～5.57g/m3，眼刺激流泪、头痛、恶心；人经口150ml，致死；人经皮0.001%，皮肤接触后干燥、发红、干裂等。
亚急性和慢性毒性：小鼠经皮240g/kg×20周，最小中毒浓度。
危险特性：其蒸气与空气形成爆炸性混合物，遇明火、高热能引起燃烧爆炸。与氧化剂能发生强烈反应。若遇高热，容器内压增大，有开裂和爆炸的危险。
燃烧(分解)产物：一氧化碳、二氧化碳。
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◎松節油 Turpentine oil
臨床症狀︰症狀為腹部灼燒感、嘔心、嘔吐、腹瀉、小便困難、血尿、意識不清、淺呼吸、 驚厥。
口服︰15mg的揮發油如松節油就可以造成死亡。
吸入︰造成眩暈，快而淺的呼吸、心跳加快、支氣管刺激、意識不清或痙攣。
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【毒性及燃爆性】刺激眼睛、鼻、咽喉；吸入浓度过高，引起头痛、头昏、恶心、精神错乱、脉搏加速、损伤肾功能、肌肉抽搐，甚至死亡；接触会灼伤眼睛，致皮肤过敏，产生湿疹。
本品易燃，容器在火中爆炸，爆炸下限：0.8%。
【个人防护】严禁烟火；穿防护服，避免皮肤接触；戴护目镜，避免眼接触；选用适当的呼吸器。
我的看法是，TO也是有毒的，只是相形之下，我还是觉得TO毒副作用比二甲苯小些。以上情况都是浓度比较高的情况下发生的，实际工作中，我们接触的环境浓度远远小于上面那些情况。
在这个冬天，使用TO时，又发现了两个问题。
一个是南方冬天，室内没有暖气，室温与室外温度相差无几，当室温低于20度以后，切片作HE染色时，用TO脱蜡效果不好，两缸脱蜡时间延长到30分钟，切片上仍然有残余蜡。问本院用过TO的技术员，过去是采用烤箱加热到40-60度脱蜡。我将脱蜡的两缸改回二甲苯，问题就解决了。因为过缸时沥干试剂的时间很短，所以二甲苯在空气里挥发的时间也很短，几乎闻不到什么气味。最后封片时的3缸仍然用TO。
染片在二甲苯或TO里浸过后，放在室外风干，我也注意到，同样的时间，如果是二甲苯，半个小时，可以挥发干净，而TO试剂4-5个小时也不会干。显然，二甲苯的挥发性大大高于TO，同样长的操作时间，室内二甲苯的含量必然是大大多于TO 的含量。
另外，TO对脂肪组织的脱脂效果不好，脂肪组织，经过酒精逐级脱水后，在TO里浸5个小时，再重新和别的组织一起进入脱水机，最后制成的蜡块切片的感觉与没有经过这样处理的一样，仍然非常难切。而经过二甲苯较长时间浸泡脱脂的，切片效果要好许多。
总之，我觉得用TO制片和用二甲苯制片没有太大的区别。
如果二甲苯真的会使白细胞下降的话。那么二甲苯虽然不会直接致癌，但是白细胞下降必然引起免疫力的下降，那样一来，不但会引起别的疾病，也是会间接致癌的。器官移植使用了免疫抑制剂，AIDS引起的免疫缺陷，其结果都会导致恶性肿瘤的高发的。
所以我认为，如果没有通风橱，如果制片的量比较大，只要可能，还是应该尽可能减少二甲苯的使用为好。
