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根据文献,我准备做大鼠脑fos基因免疫组化染色。实验步骤大体是:大鼠分批戊巴比妥钠腹腔注射深度麻醉,先用生理盐水心脏灌流以去除血液,再用多聚甲醛灌注固定,取脑,多聚甲聚后固定,蔗糖浸泡至沉底,冰冻切片。因为大鼠分批处死,所以,切片在冰冻液中-20C保存。等全部动物处理完毕后,一起免疫组化染色。
请各位指教:
1。根据文献,切片可以在冰冻液中-20C保存数月至一年,仍保留免疫活性。那么我们先不切片,把脑组织放入冰冻液中,能不能长时间保存?
2。石蜡切片免疫组化染色时,是先裱片、固定,再染色。请问:冰冻切片也是先裱片再染色吗?
其它问题及注意事项,请一并指教。
多谢!