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蝴蝶兰dali2003 离线
以下是引用zhaoxr66在2009-9-20 15:35:00的发言: 冰冻切片时用的包埋液就有固定的作用吧 |
此固定非彼固定。
包埋液固定是起支撑的作用,也就是当标本小的时间,为不至于切到金属托盘,用胶水打个底,厚一点,组织容易切到、切全。
而切片后的固定是为了保持细胞的形态及细胞内的物质与组织活着的时候相近。
固定是必须的,只须10-20秒,主要看核内的结构是否清晰,其理论和细胞涂片湿固定与干固定一样,其结果也一样。
以下是引用dingwei在2009-9-21 22:20:00的发言:
此固定非彼固定。 包埋液固定是起支撑的作用,也就是当标本小的时间,为不至于切到金属托盘,用胶水打个底,厚一点,组织容易切到、切全。 而切片后的固定是为了保持细胞的形态及细胞内的物质与组织活着的时候相近。 固定是必须的,只须10-20秒,主要看核内的结构是否清晰,其理论和细胞涂片湿固定与干固定一样,其结果也一样。 |
我做过对照,切了5张切片,分别固定1分钟,3分钟,5分钟,10分钟,还有一张不固定的,染完色后镜下细胞形态并没有差异(已经我科知名考专家鉴定),相反不固定的切片反而颜色更鲜艳些,所以支持不固定的!现在我也基本上冰冻不固定。
冰冻制片时间:医生取材1-5min,制片5分钟,染色:苏木素30秒,伊红:2-5秒,直接经无水乙醇脱去组织的水分(时间约为5-10秒,不停的震荡)后直接烤箱(76度)烘干后封片,所以染色封片-封片过程2分钟左右,总体时间:从接到冰冻开始计时,从取材到制出切片15分钟时间还是很富裕的,剩下的15分钟留给医生诊断。
一句话:实践出真理!!建议取消固定环节