替一位朋友提问：如何在血液中提取中性粒细胞？！

小荷离线: 帖子：8546; 粉蓝豆：97; 经验：12725; 注册时间：2006-09-11; 加关注 | 发消息

楼主发表于 2009-08-26 01:39|举报|关注(0)
浏览排序[ 顺序逆序楼主支持精彩 ] 快捷回复

急请老师和朋友们回复,指点，非常感谢！

标签：

本帖最后由于 2009-08-26 01:40:00 编辑

0

: 没有完美的个人，只有完美的团队

添加参考诊断

×参考诊断

小荷离线: 帖子：8546; 粉蓝豆：97; 经验：12725; 注册时间：2006-09-11; 加关注 | 发消息

1 楼发表于2009-09-05 19:32:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复

感谢各位朋友的回复，谢谢！

0

: 没有完美的个人，只有完美的团队

chinaroc 离线: 帖子：1168; 粉蓝豆：924; 经验：1343; 注册时间：2006-11-01; 加关注 | 发消息

2 楼发表于2009-09-05 19:29:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复

需要加入溶血剂，然后离心留取细胞成分即可

0

: 用心做事、真情做人！

hp200018 离线: 帖子：185; 粉蓝豆：2; 经验：349; 注册时间：2009-05-13; 加关注 | 发消息

3 楼发表于2009-09-02 21:16:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复

0

doctorjing 离线: 帖子：67; 粉蓝豆：45; 经验：118; 注册时间：2009-05-25; 加关注 | 发消息

4 楼发表于2009-09-01 21:44:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复

淋巴细胞分离液分离后的第四层中，最上面薄薄的一层白膜层为中性粒细胞主要所在部位，可以轻轻用滴管吸取（第三层主要是单个核细胞，可以不取，第四层下面主要为红细胞也可以不要），然后用Hank's液或者PBS洗涤，要想多一些细胞，可以多采集一些血样本。

0

可可离线: 帖子：829; 粉蓝豆：446; 经验：1393; 注册时间：2009-08-08; 加关注 | 发消息

5 楼发表于2009-08-31 12:13:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复

淋巴细胞梯度离心法收集淋巴细胞的量会很多，这个粒细胞还真不知道如何提高检出率！

期待大家的继续跟帖！

学习了！

0

: 眼看，心悟，博览群书，行万里路～爱家爱国爱自己！

xinzhiwen119 离线: 帖子：4; 粉蓝豆：33; 经验：63; 注册时间：2009-08-30; 加关注 | 发消息

6 楼发表于2009-08-30 22:10:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复

受教了

0

永恒爱恋离线: 帖子：571; 粉蓝豆：34; 经验：831; 注册时间：2009-08-21; 加关注 | 发消息

7 楼发表于2009-08-29 21:29:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复

0

: 只要你的脚还在地面上，就别把自己看得太轻；只要你还生活在地球上，就别把自己看得太大

海上明月离线: 帖子：9476; 粉蓝豆：1172; 经验：10007; 注册时间：2009-08-29; 加关注 | 发消息

8 楼发表于2009-08-29 14:35:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复

小荷说得很专业啊！

0

: 王军臣

小荷离线: 帖子：8546; 粉蓝豆：97; 经验：12725; 注册时间：2006-09-11; 加关注 | 发消息

9 楼发表于2009-08-29 09:43:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复

取新鲜抗凝血10ml，与10ml Hank's混匀，小心加到10-15ml细胞分离液之液面上，800转/分20-25分钟，分离3层；第一层，血浆或组织匀浆液层；中间层：白细胞层；第三层：红细胞层。留取第一层待用。手机中间层细胞，加入1倍以上的PBS或Hank's混匀，2500转/分离心30分钟，弃上清，留沉淀。在沉淀中加入留取的第一层匀浆层细胞，混匀。

再用淋巴细胞分离液提取分离粒细胞：编号LTS1077

取上述混合后液体小心加在加入液体量一半量的淋巴细胞分离液上，1500转/分15分钟，分四层；第一层，血浆层；第二层，淋巴细胞层；第三层，透明分离液；第四层：红细胞和粒细胞层。收集第三层和四层细胞，加入适量Hank's混匀，2000-2500转/分离心20-25分钟；再用同样洗涤液洗涤细胞2次，以洗去残留的淋巴细胞分离液。再用细胞培养液将细胞调配成适当浓度。

上面是朋友发过来的操作步骤，问题是：检出率很低，粒细胞只有6%。