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请问各位前辈,您所在的医院开展FISH技术了吗?大家交流下感受

付大帅 离线

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楼主 发表于 2009-08-23 17:26|举报|关注(1)
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各位前辈,单位是否开展了FISH技术,都有些什么体会呢?希望大家再此处分享。
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hkwalla 离线

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21 楼    发表于2012-10-31 14:18:21举报|引用
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本帖最后由 hkwalla 于 2012-10-31 14:19:28 编辑

建议使用德国ZytoVision公司的Zytolight FISH Probe(包括:Her2,ALK,ALK-EML4,ROS1,FGFR1,FGFR2,BCR-ABL等等),具有CE/IVD认证,质量稳定,操作简单,建议试试。探针由香港华创贸易国际有限公司提供,电话010-64484022、18611641282。

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科学技术是第一生产力

marchjosephine 离线

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2 楼    发表于2010-11-16 16:43:00举报|引用
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Dako也有FISH (白血病和淋巴瘤)诊断的试剂盒,Her2 FISH有FDA认证

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wy1992 在线

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3 楼    发表于2010-01-06 20:00:00举报|引用
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 我科做的高危原位分子杂交不知何原因,就是厂商提供的阳性片子,高危的HPV探针同样做不出阳性,请那位老师指点一下!谢谢!
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朱正龙

jani 离线

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4 楼    发表于2010-01-06 19:55:00举报|引用
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 我们医院也要开展FISH了 
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只有做你不会做的事 才能做会所有的事

dw417 离线

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5 楼    发表于2009-12-01 09:54:00举报|引用
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养默而后知多言之为燥!

life-wuhongbo 离线

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6 楼    发表于2009-10-26 15:37:00举报|引用
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小弟现在正要开始做FISH实验,我主要是做白血病的,现在不知道用哪家探针较好,VYSIS,KREATECH,金菩嘉的都有推销过,因为小弟以前没有做过相关实验,所以请各位指点一下,哪一家的探针比较好

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chinaroc 离线

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7 楼    发表于2009-10-21 12:31:00举报|引用
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目前北京市病理质控中心的高子芬教授正在组织培训,如果下一步政策及市场启动,那么将会变成下一个免疫组化。

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duanfl8888 离线

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8 楼    发表于2009-10-20 22:10:00举报|引用
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 我们正在准备开展这个项目
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段芳蕾 离线

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9 楼    发表于2009-10-20 21:40:00举报|引用
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 实验室正在筹建中
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xmingtang 离线

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10 楼    发表于2009-09-29 22:03:00举报|引用
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 我们用的国产试剂,金菩嘉公司的也可以。
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天天田田 离线

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11 楼    发表于2009-09-08 17:33:00举报|引用
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 我们也要准备做FISH了。

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dingwei 离线

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12 楼    发表于2009-09-06 19:01:00举报|引用
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 FISH注意事项:

1、37℃蛋白酶K消化10-15分钟是关键,要看切片的厚薄和蜡块存放时间的长短。有点麻烦。

2、组织福马林固定时间不能太长,如星期五取材的,星期一制片就可能会减弱。

3、试剂盒有差异,Vysis的产品较好。

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本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!中华病理技术网:http://www.zhbljs.com/

chinaroc 离线

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13 楼    发表于2009-09-05 19:30:00举报|引用
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 探针的制备问题是关系成本和运营的长久问题,做具体的可以买Vysis的产品,不需要费心。
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redsnow007 离线

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14 楼    发表于2009-08-29 22:48:00举报|引用
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我们医院开展有两年多了,FISH技术比较成熟,以下是乳腺石蜡切片样本FISH实验流程

一、玻片预处理

1、65℃烤片过夜。

2、室温 二甲苯15分钟 X 3次。

3、室温 100%酒精5分钟X 2次。

4、室温 85%酒精、70%酒精各3分钟。

5、室温 去离子水3分钟,用无绒纸巾吸取多余水分。

6、90℃,去离子水煮沸25分钟或免疫组化修复液(PH7.0)煮沸20分钟。

7、待片子室温晾干后,37℃蛋白酶K消化12-15分钟(取0.4ml蛋白酶K储存

液(20mg/ml)溶于40ml 2xSSC(PH7.0),得到蛋白酶K工作液(200μg/ml)。如果是免疫组化修复液,蛋白酶K修复10分钟。

8、室温,2xSSC 5分钟2次

9、室温,70%、85%、100%乙醇脱水各3分钟。

10、自然干燥玻片。

二、变性杂交

杂交仪变性杂交流程

1.56℃,烤片2-5分钟

2、探针准备:①交液8μl

             ②探针2μl

   加入到0.5ml离心管中混匀,离心1-3秒,混匀备用。

3、将10μl探针混合物加于玻片杂交区域,立即加盖盖玻片,用橡皮胶封边。

4、准备杂交仪,共变性条件:83℃ 5分钟,杂交条件:42℃16小时。

三、玻片洗涤与观察

1、46℃,2xSSC 10分钟

2、46℃,0.1%NP-40/2xSSC 5分钟

3、室温,70%乙醇3分钟 

4、暗处自然干燥玻片。

5、室温,将15μl DAPI复染剂滴加于杂交区域,立即盖上盖玻片,15分钟后观察。

四、判断标准

    分别数30个癌细胞的红绿信号数,设红信号与绿信号的比值为K

    ①当K〈1.8时       判为阴性

    ②当1.8〈K〈2.2时  为临界值

    ③当K〉2.2时       判为阳性

    当K为临界值时,要重新数100个癌细胞的红绿信号数,再计算比值。计算仍为临界值的,则要重做或另取材。

 

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流浪de鸽..
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付大帅 离线

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15 楼    发表于2009-08-28 23:28:00举报|引用
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 我院也要开展这个了 设备已经来了 房间正在装修中

请问下这个是由技术组的老师们操作吗?

还有就是您那里开展了那些组织的?有多少探针?

我院腺体外科要求乳腺病人都做FISH

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wangzhen_01 离线

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16 楼    发表于2009-08-27 22:48:00举报|引用
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 能不能请那位老师提供你们常用的探针的出处,大小,贴一个FISH的步骤上来,比如Her-2/New,EGFR的,谢谢。
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吾表兄,年四十余。始从文,连考三年而不中。遂习武,练武场上发一矢,中鼓吏,逐之出。改学医,自撰一良方,服之,卒。

湖南老鬼 离线

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17 楼    发表于2009-08-27 20:50:00举报|引用
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 在做时你要注意什么吧?

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陈森林

湖南老鬼 离线

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18 楼    发表于2009-08-27 20:49:00举报|引用
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以下是引用付大帅在2009-8-23 17:26:00的发言:

各位前辈,单位是否开展了FISH技术,都有些什么体会呢?希望大家再此处分享。

我院已经开展了,不知你想问什么呢?

 

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陈森林

liuyn 离线

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19 楼    发表于2009-08-27 16:27:00举报|引用
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以下是引用我爱我家在2009-8-23 22:45:00的发言:

 我也想了解一下

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刘志谦

wangzhen_01 离线

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20 楼    发表于2009-08-27 11:30:00举报|引用
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 欢迎大家交流,我做过几次FISH,
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吾表兄,年四十余。始从文,连考三年而不中。遂习武,练武场上发一矢,中鼓吏,逐之出。改学医,自撰一良方,服之,卒。
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