请教巢式ＰＣＲ - 华夏病理网论坛

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请教巢式ＰＣＲ

zoujane 离线: 帖子：5; 粉蓝豆：238; 经验：9; 注册时间：2007-05-15; 加关注 | 发消息

楼主发表于 2007-05-15 22:11|举报|关注(0)
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我的课题中将涉及巢式ＰＣＲ检测外周血中癌干细胞标志物，不知两位版主能否提供相关参考意见（可行性？），或能否告诉我相关参考书名？

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: 空想家

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wangzhen_01 离线: 帖子：197; 粉蓝豆：3; 经验：197; 注册时间：2006-10-04; 加关注 | 发消息

1 楼发表于2007-09-17 22:10:00举报|引用
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谢谢bqwmd老师的讲解。

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: 吾表兄，年四十余。始从文，连考三年而不中。遂习武，练武场上发一矢，中鼓吏，逐之出。改学医，自撰一良方，服之，卒。

sophietxy 离线: 帖子：170; 粉蓝豆：6; 经验：299; 注册时间：2007-08-30; 加关注 | 发消息

2 楼发表于2007-09-17 15:28:00举报|引用
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以下是引用bqwmd在2007-7-27 16:07:00的发言：

^{何谓巢式PCR（Nested PCR）?针对要扩增的靶基因，设计两对引物，一对在外侧，一对在内侧。PCR操作程序是先扩增第一对引物（外侧的）的靶序列；再应用第二对引物（内侧的）进行第二次扩增。第二次靶序列较第一次扩增的靶序列缩短。采用巢式PCR，其目的是针对原始摸板量小，通过二次扩增，以增加灵敏性。巢式PCR由于反复扩增，加大污染机会，而临床实验室多不采用。}

我所知的是使用巢式PCR 巢式引物进行连续多轮扩增可以提高特异性和灵敏度。临床实验室的情况不了解，愿意学习。

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abin 离线: 帖子：7412; 粉蓝豆：6014; 经验：11783; 注册时间：2006-10-08; 加关注 | 发消息

3 楼发表于2007-07-27 20:38:00举报|引用
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吴老亲自指点，提携后进，令人感动！

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华夏病理/粉蓝医疗

为基层医院病理科提供全面解决方案，

努力让人人享有便捷准确可靠的病理诊断服务。

bqwmd 离线: 帖子：15; 粉蓝豆：2; 经验：15; 注册时间：2007-03-13; 加关注 | 发消息

4 楼发表于2007-07-27 16:07:00举报|引用
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^{何谓巢式PCR（Nested PCR）?针对要扩增的靶基因，设计两对引物，一对在外侧，一对在内侧。PCR操作程序是先扩增第一对引物（外侧的）的靶序列；再应用第二对引物（内侧的）进行第二次扩增。第二次靶序列较第一次扩增的靶序列缩短。采用巢式PCR，其目的是针对原始摸板量小，通过二次扩增，以增加灵敏性。巢式PCR由于反复扩增，加大污染机会，而临床实验室多不采用。}