分子克隆指南是本好书,但翻译了读起来有些难度.我可以推荐一本书,但是需要隔天告诉你.

巢式pcr是二次PCR,分为完全和半巢式,初次引物先扩增目的基因大片断,然后再扩增已扩增片断内的区域.

^{何谓巢式PCR（Nested PCR）?针对要扩增的靶基因，设计两对引物，一对在外侧，一对在内侧。PCR操作程序是先扩增第一对引物（外侧的）的靶序列；再应用第二对引物（内侧的）进行第二次扩增。第二次靶序列较第一次扩增的靶序列缩短。采用巢式PCR，其目的是针对原始摸板量小，通过二次扩增，以增加灵敏性。巢式PCR由于反复扩增，加大污染机会，而临床实验室多不采用。}