共1页/3条首页上一页1下一页尾页
回复:3 阅读:2305
请教各位老师关于HPV原位杂交的一些技术问题

wangxf_1997 离线

帖子:67
粉蓝豆:210
经验:77
注册时间:2008-08-22
加关注  |  发消息
楼主 发表于 2008-12-08 19:41|举报|关注(1)
浏览排序[ 顺序 逆序 楼主 支持 精彩 ]  快捷回复

我们科里刚买回HPV原位杂交试剂盒,因为资金原因没有买原位杂交仪,在关键步骤变性和杂交上用的方法是:

1.变性:加有探针的玻片放入胶带密封的铝制饭盒中,在95℃水浴锅中加热10分钟,希望能使DNA双链解开

2.杂交:加热结束后,立即将饭盒放入盛冰袋的盒子中,然后饭盒的四周和上面均放冰袋,希望是组织马上降温,是DNA保持双链的结构,5分钟后将饭盒放入37℃恒温箱中过夜,完成杂交步骤。

可按照试验步骤显色却不尽如人意,结果要不弱阳,要不就干脆阴性。想不出问题出在哪?

变性温度必须是95℃吗,用水浴锅很难保持在一个温度上,高于95℃对组织有影响吗?

标签:
0
添加参考诊断
×参考诊断
  

dingwei 离线

帖子:938
粉蓝豆:1062
经验:1175
注册时间:2006-09-25
加关注  |  发消息
1 楼    发表于2008-12-08 20:54:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复

 我试过,高过95℃也可以,就是背景高一点点。

铝制饭盒为什么要胶带密封?不需要。

加热结束后,可以立即将玻片拿出放在冰上,又快又好。

0
回复
signature
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!中华病理技术网:http://www.zhbljs.com/

wangxf_1997 离线

帖子:67
粉蓝豆:210
经验:77
注册时间:2008-08-22
加关注  |  发消息
2 楼    发表于2008-12-08 22:02:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复
 真是太感谢了!
0
回复

dingwei 离线

帖子:938
粉蓝豆:1062
经验:1175
注册时间:2006-09-25
加关注  |  发消息
3 楼    发表于2008-12-10 22:18:00举报|引用
返回顶部 | 快捷回复
 原位杂交显色时间很长
0
回复
signature
本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!中华病理技术网:http://www.zhbljs.com/
回复:3 阅读:2305
共1页/3条首页上一页1下一页尾页
【免责声明】讨论内容仅作学术交流之用,不作为诊疗依据,由此而引起的法律问题作者及本站不承担任何责任。
快速回复
进入高级回复
您最多可输入10000个汉字,按 "Ctrl" + "Enter" 直接发送
搜索回复/乘电梯 ×
按内容
按会员
乘电梯
合作伙伴
友情链接