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wangxf_1997 离线
我们科里刚买回HPV原位杂交试剂盒,因为资金原因没有买原位杂交仪,在关键步骤变性和杂交上用的方法是:
1.变性:加有探针的玻片放入胶带密封的铝制饭盒中,在95℃水浴锅中加热10分钟,希望能使DNA双链解开。
2.杂交:加热结束后,立即将饭盒放入盛冰袋的盒子中,然后饭盒的四周和上面均放冰袋,希望是组织马上降温,是DNA保持双链的结构,5分钟后将饭盒放入37℃恒温箱中过夜,完成杂交步骤。
可按照试验步骤显色却不尽如人意,结果要不弱阳,要不就干脆阴性。想不出问题出在哪?
变性温度必须是95℃吗,用水浴锅很难保持在一个温度上,高于95℃对组织有影响吗?
wangxf_1997 离线