我们科里刚买回ＨＰＶ原位杂交试剂盒，因为资金原因没有买原位杂交仪，在关键步骤变性和杂交上用的方法是：

1.变性：加有探针的玻片放入胶带密封的铝制饭盒中，在95℃水浴锅中加热10分钟，希望能使ＤＮＡ双链解开。

2.杂交：加热结束后，立即将饭盒放入盛冰袋的盒子中，然后饭盒的四周和上面均放冰袋，希望是组织马上降温，是ＤＮＡ保持双链的结构，５分钟后将饭盒放入37℃恒温箱中过夜，完成杂交步骤。

可按照试验步骤显色却不尽如人意，结果要不弱阳，要不就干脆阴性。想不出问题出在哪？

变性温度必须是95℃吗，用水浴锅很难保持在一个温度上，高于95℃对组织有影响吗？

 我试过，高过95℃也可以，就是背景高一点点。

铝制饭盒为什么要胶带密封？不需要。

加热结束后，可以立即将玻片拿出放在冰上，又快又好。