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(1)冰箱冷藏室过夜是错误的,苏木素配好后快速冷却,目的是为了防止在高温下氧化剂作用过快而过度氧化。然而,至室温后,还需要长时间苏木素的氧化成熟过程,这也就是为什么冬天气温低、苏木素不容易成熟的原因。而你的低温阻止了苏木素的成熟。
(2)改良Lillie-Mayer’s苏木素在原有的配方上加了甘油,目的是为了延缓氧化的过程,对粘液组织(如肠粘膜)、胞浆容易出现共染现象,这只适合于苏木素的染片数量赶不过氧化速度:即标本量少(也就是说一个月少于2000张切片)的单位。一般来说,所谓的改良,大多数都没有原有的好。改良Lillie-Mayer’s苏木素不是不会出氧化膜,而是出的速度比较慢,往往还没出现,你已经换了。
(3)出现氧化膜,说明你的苏木素已经过氧化了,如果过滤后不久又出现了,那就应该更换新的苏木素了。苏木素的最佳染色是有量的标准,一般500ml也就能染1800-2000张切片。不是能染上就是好的苏木素,要色彩鲜艳,对比鲜明。
(4)如果加入氧化汞无反应,那肯定是氧化汞质量有问题了。
(5) Gill苏木素液染色效果肯定没有Harris好,主要是氧化速度较慢,特别是室温低于20度时更明显。为了增加其氧化过程,你可以把配好的苏木素放在36度温箱3-5天后再拿出使用。由于现在买氧化汞很麻烦,要公安局批,所以我们现在都用Gill苏木素。
zhangnl132 离线
baiyawei145 离线
dagouxiong 离线
谢谢周祀侨、197、ZXH887119老师的回复。
我们科室根据自己的实际情况换算后的苏木素配制成分为:苏木素:3.5g、硫酸铝钾:52.5g、无水乙醇:35ml、蒸馏水:700ml、氧化汞:1.75g、冰醋酸:35ml。
配制方法为:先用蒸馏水加热溶解硫酸铝钾,用无水乙醇溶解苏木素,然后倒入已溶解的硫酸铝钾水溶液中,煮沸1分钟。离火加入氧化汞,然后继续加热煮沸0.5-1分钟,(我们也试过不离火直接加氧化汞,效果同样不好)随即用自来水冲使染液迅速冷却,之后用纱布盖住瓶口,放于冰箱冷藏室过夜。次日过滤两次后加冰醋酸使用。
请各位看看我们的配制方法是否存在什么漏洞?
不用加热;碘酸钠应该能称准吧,实在不行,用高级分析天平
敞开放置没试过,您不妨试试;
我们是两月更换差不多;染色时间先短后长,据说与不同的批号产家的染料都有关,少时不到一分钟,多时五六分钟大概;用久了,背景细胞浆似比较灰。个人觉得也许可以做几个尝试:,比如,或许配制时减少醋酸量能不使染色速度太快。据说有的苏木素配方是新配的与用旧的混合起来使用非常好,不知道这种配方是不是也适用这样的新对旧的办法,不妨试试。
用在细胞学染色?要是为妇科细胞学,我觉得还是巴氏好。我们刚刚把HE改成巴氏,虽然染得不是很到位,但还觉得比HE清丽。
哎呀,其实染色我不在行,还是请行家们给些指点吧。我和楼主都很感谢!