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(1)冰箱冷藏室过夜是错误的,苏木素配好后快速冷却,目的是为了防止在高温下氧化剂作用过快而过度氧化。然而,至室温后,还需要长时间苏木素的氧化成熟过程,这也就是为什么冬天气温低、苏木素不容易成熟的原因。而你的低温阻止了苏木素的成熟。
(2)改良Lillie-Mayer’s苏木素在原有的配方上加了甘油,目的是为了延缓氧化的过程,对粘液组织(如肠粘膜)、胞浆容易出现共染现象,这只适合于苏木素的染片数量赶不过氧化速度:即标本量少(也就是说一个月少于2000张切片)的单位。一般来说,所谓的改良,大多数都没有原有的好。改良Lillie-Mayer’s苏木素不是不会出氧化膜,而是出的速度比较慢,往往还没出现,你已经换了。
(3)出现氧化膜,说明你的苏木素已经过氧化了,如果过滤后不久又出现了,那就应该更换新的苏木素了。苏木素的最佳染色是有量的标准,一般500ml也就能染1800-2000张切片。不是能染上就是好的苏木素,要色彩鲜艳,对比鲜明。
(4)如果加入氧化汞无反应,那肯定是氧化汞质量有问题了。
(5) Gill苏木素液染色效果肯定没有Harris好,主要是氧化速度较慢,特别是室温低于20度时更明显。为了增加其氧化过程,你可以把配好的苏木素放在36度温箱3-5天后再拿出使用。由于现在买氧化汞很麻烦,要公安局批,所以我们现在都用Gill苏木素。