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各位老师好,学生请教液基细胞学技术问题!

dama0609 离线

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楼主 发表于 2011-05-15 11:04|举报|关注(0)
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各位老师,宫颈液基细胞学我们用的是离心甩片的制片方法,制片后95%酒精固定都在1个小时以上,但标本脱片现象很严重,尤其在染苏木素、分化后,水洗时明显脱片,玻片上几乎不剩细胞。故请教老师是何原因呢?是标本取材不好,血性标本更是?保存不当,保存液不好?制片方法不好?我们不知如何改进!!再有,老师们如何处理血性标本呢?!谢谢!!
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巴山夜雨涨秋池 离线

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1 楼    发表于2011-05-15 21:01:00举报|引用
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 标本脱片是所有或大多数脱片,还是血性样本?说具体些,给你分析分析。
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dama0609 离线

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2 楼    发表于2011-05-16 07:04:00举报|引用
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 大多数标本都有或多或少脱片现象,血性标本更不用说,前天做的一例标本,到分化后水洗时,一个细胞都不剩,再制一次片,结果还是如此!不知为何,求老师指教!
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张椽 离线

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3 楼    发表于2011-06-12 08:25:00举报|引用
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 你是不是用的宫颈刷片来取材后放在细胞保存液里,最后才送到病理科的。如果是你的那种做法就容易掉片,这种做出来的涂片细胞没有粘附力了。本身保存液就有固定作用,你再固定就没有意义了。你离心后是不是用沉淀物涂片的,如果是,你涂片之后把片子平放几分钟后把片子上的上清液倒掉,然后用滴加法来染色。可用苏木素或瑞士染液来染。
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troy 离线

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4 楼    发表于2011-06-12 12:56:00举报|引用
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troy 离线

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5 楼    发表于2011-06-12 12:57:00举报|引用
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我认为是固定时间太长。

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yangzhijun 离线

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6 楼    发表于2011-06-16 08:27:00举报|引用
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用防脱玻片。

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红叶知秋 离线

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7 楼    发表于2011-06-16 16:43:00举报|引用
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 建议你更换试剂与玻片。要用防脱玻片,还有保存液内有溶解红细胞的成份。你说的这些实际上都不是技术上的问题。强烈建议更换

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我爱华夏,更爱华夏的各位良师益友!你是我学习的乐园!

巴山夜雨涨秋池 离线

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8 楼    发表于2011-06-16 22:00:00举报|引用
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 大致分析几个原因,你自己检查一下。

1。制出来的片子不能太厚。不要以为厚能提高阳性率或观察方便。固然有这个规律,但太厚掉片,就适得其反了。对可疑的片,可据首片情况重制片观察。

2。甩出来的片,不能有明显水份,虽不完全干透,但明显过湿的片子有可能掉片。所谓湿固定,不要狭义理解。明显水份的片子在新鲜九五酒精中可能不掉,用久了,酒精已无九五,再遇明显湿片,固定不好。

3。固定液是否换新的?

4。部分掉片的原因跟保存液有关。大量胞浆蛋白被溶后,所制片中蛋白不足,固定时无法紧固在玻片上。所有原因找完,都不解决问题,可考虑换保存液。如果标本量不大,且不嫌麻烦的话,在甩出来的片上加入血清,可解决此问题。

5。苏木素本染后,如掉片,要小心过水。适当洗掉多余染液即可。必要时以酒精代水洗染液。后再进入盐酸酒精分化。当然,这片出来的片,可能有染液渣渣。在一定程度上影响观察。看多了,也不怕的。

6。破坏红细胞公认的是在保存液中加入冰醋酸。

其他不多说。

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