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在常规病理制片工作中,造成组织片脱片的原因有:a、载玻片不清洁;b、捞贴片后片子未考干;c、切片太厚;d、染色时蜡未脱尽。除上述原因外,在退色时也会发生脱片现象,为此我们分析原因进行改进,收到粒很好的效果。
1、材料和方法
取浓盐酸6ML、蒸馏水394ML混合成1.5%的盐酸水溶液。需要注意的是,配制时一定要将盐酸慢慢注入水中,避免发生意外
2、结果
用1.5%的盐酸水溶液对组织进行分化,速度适中,结果对比清晰。
3、讨论
在退行性HE染色(选用Harris苏木素)过程中,为了把附在组织细胞上的多余染色剂脱去,使目的物与周围组织形成鲜明的对比,同时使目的物本身的色泽也深浅适中,通常选用盐酸乙醇液。此溶液能与媒染剂(金属)相结合形成可溶性盐类,从此打开了媒染剂与组织细胞的结合,使组织细胞脱色【1】。我们认为,盐酸乙醇分化组织片起主要作用的是盐酸而不是乙醇,并且乙醇还有一定的副作用:当组织片脱蜡至水洗时,因组织吸水而发生膨胀,而在分化组织片过程中,由于乙醇的脱水作用而使组织收缩,使组织由膨胀到收缩的过程过于强烈,从而产生脱片现象。根据上述原因,我们去除了盐酸乙醇液中的乙醇,改用盐酸水溶液,并对此做了相关实验,结果显示,1%的盐酸水溶液对组织分化速度缓慢,而2%的盐酸水溶液对组织片分化的速度较快,不易控制,而1.5%的盐酸水溶液分化效果良好,累计制片3000余张,均未发现脱片现象。
我们认为1.5%的盐酸水溶液代替盐酸乙醇分化液,既可以避免脱片又具有配制容易,操作简单,节省成本等优点,值得推广。
(本文承蒙浙江病理质控中心胡锦林老师审阅,特此致谢!)
参考文献:
【1】龚志锦,詹鎔洲.病理组织制片与染色技术【M】.上海:上海科学技术出版社,1994.35.
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