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介绍一只改良的分化液(摘自诊断病理学杂质2008年4月第15卷第2期)

mabanglei 离线

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楼主 发表于 2008-06-06 09:37|举报|关注(0)
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    在常规病理制片工作中,造成组织片脱片的原因有:a、载玻片不清洁;b、捞贴片后片子未考干;c、切片太厚;d、染色时蜡未脱尽。除上述原因外,在退色时也会发生脱片现象,为此我们分析原因进行改进,收到粒很好的效果。

1、材料和方法

取浓盐酸6ML、蒸馏水394ML混合成1.5%的盐酸水溶液。需要注意的是,配制时一定要将盐酸慢慢注入水中,避免发生意外

2、结果

   用1.5%的盐酸水溶液对组织进行分化,速度适中,结果对比清晰。

3、讨论

   在退行性HE染色(选用Harris苏木素)过程中,为了把附在组织细胞上的多余染色剂脱去,使目的物与周围组织形成鲜明的对比,同时使目的物本身的色泽也深浅适中,通常选用盐酸乙醇液。此溶液能与媒染剂(金属)相结合形成可溶性盐类,从此打开了媒染剂与组织细胞的结合,使组织细胞脱色1。我们认为,盐酸乙醇分化组织片起主要作用的是盐酸而不是乙醇,并且乙醇还有一定的副作用:当组织片脱蜡至水洗时,因组织吸水而发生膨胀,而在分化组织片过程中,由于乙醇的脱水作用而使组织收缩,使组织由膨胀到收缩的过程过于强烈,从而产生脱片现象。根据上述原因,我们去除了盐酸乙醇液中的乙醇,改用盐酸水溶液,并对此做了相关实验,结果显示,1%的盐酸水溶液对组织分化速度缓慢,而2%的盐酸水溶液对组织片分化的速度较快,不易控制,而1.5%的盐酸水溶液分化效果良好,累计制片3000余张,均未发现脱片现象。

我们认为1.5%的盐酸水溶液代替盐酸乙醇分化液,既可以避免脱片又具有配制容易,操作简单,节省成本等优点,值得推广。

(本文承蒙浙江病理质控中心胡锦林老师审阅,特此致谢!)

 

参考文献:

1】龚志锦,詹鎔洲.病理组织制片与染色技术【M.上海:上海科学技术出版社,1994.35.

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197 离线

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1 楼    发表于2008-06-06 13:12:00举报|引用
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 还省酒精!好!
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dingwei 离线

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2 楼    发表于2008-06-08 16:10:00举报|引用
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改良的方法一般来说不会比 经典的好,当初设计分化液时一定做了很多实践,一上来肯定是先选择最简单的水,然后才用其它东西来配,最后选用酒精配一定有其道理,只是我们忽视了或没有发现。

        很早以前,我们也曾用水配过一年,当时的出发点就是感觉得效果差不多,还方便。但使用了一段时间后最终还是选择了传统的酒精。因为使用一段时间后发现,使用酒精有它的道理:一、起到缓冲的作用,使分化速度减慢,作用比较均匀,而用水分化偶尔会有切片着色不均匀的现象,特别是分化好了拿出来过程中,动作慢的人特别多一点。二、酒精起到对切片的固定作用,这和作者的观点正好相反,不信大家可以试一下,一张切片放在75%酒精里一年,它还粘在玻片上,如果放在水里,几天就掉了。长时间如此、短时间也一样,只是对脱水好的切片没什么作用,对于某些脱水不好的切片,还是有一定作用的。

        所以,这方法一般不提倡,因为这一点酒精并不值多少钱,一般的单位一年也省不了一百元钱。

        近几年,改良的方法很多,要晋升就要写文章,文章上的方法大家可以去试一下,但先不要应用于临床。经过一段时间试验,觉得的确比以前好的才可以用。如果一样或差不多,还是不要先用,因为经典的方法经过了长时间的检验,而改良的方法某些不确定的因素可能还没有发现。


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dingwei 离线

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3 楼    发表于2008-06-08 16:11:00举报|引用
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本帖最后由 于 2008-06-09 08:03:00 编辑

改良的方法一般来说不会比 经典的好,当初设计分化液时一定做了很多实践,一上来肯定是先选择最简单的水,然后才用其它东西来配,最后选用酒精配一定有其道理,只是我们忽视了或没有发现。

        很早以前,我们也曾用水配过一年,当时的出发点就是感觉得效果差不多,还方便。但使用了一段时间后最终还是选择了传统的酒精。因为使用一段时间后发现,使用酒精有它的道理:一、起到缓冲的作用,使分化速度减慢,作用比较均匀,而用水分化偶尔会有切片着色不均匀的现象,特别是分化好了拿出来过程中,动作慢的人特别多一点。二、酒精起到对切片的固定作用,这和作者的观点正好相反,不信大家可以试一下,一张切片放在75%酒精里一年,它还粘在玻片上,如果放在水里,几天就掉了(也可以用细胞涂片试一下)。长时间如此、短时间也一样,只是对脱水好的切片没什么作用,对于某些脱水不好的切片,还是有一定作用的。

        所以,这方法一般不提倡,因为这一点酒精并不值多少钱,一般的单位一年也省不了一百元钱。

        近几年,改良的方法很多,要晋升就要写文章,文章上的方法大家可以去试一下,但先不要应用于临床。经过一段时间试验,觉得的确比以前好的才可以用。如果一样或差不多,还是不要先用,因为经典的方法经过了长时间的检验,而改良的方法某些不确定的因素可能还没有发现。

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风的影子 离线

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4 楼    发表于2008-06-08 16:11:00举报|引用
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 谢谢!学习了
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mabanglei 离线

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5 楼    发表于2008-06-11 16:35:00举报|引用
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“只是对脱水好的切片没什么作用,对于某些脱水不好的切片”

请问丁老师,含有哪些组织的切片比较好脱水?含有哪些组织的切片比较难脱水?

谢谢!

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6 楼    发表于2008-06-11 20:19:00举报|引用
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每次看到丁大侠的发贴或回贴,总能学到很多知识和道理。欣赏+谢谢!

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x7562181 离线

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7 楼    发表于2009-10-24 11:53:00举报|引用
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每次看到丁大侠的发贴或回贴,总能学到很多知识和道理。欣赏+谢谢!

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lantian0508 离线

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8 楼    发表于2009-10-26 20:55:00举报|引用
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wangjw855 离线

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9 楼    发表于2009-10-27 19:31:00举报|引用
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 丁大侠说的太好了呀
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haruyoyo 离线

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10 楼    发表于2010-06-27 21:13:00举报|引用
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 又学到了   每天来转转  收获呀
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shzdang 离线

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11 楼    发表于2010-06-28 21:13:00举报|引用
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以下是引用haruyoyo在2010-6-27 21:13:00的发言:

 又学到了   每天来转转  收获呀

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