楼主 发表于 2020-06-29 10:41|举报|关注(1)

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硬组织脱钙切片是目前常用的方法，但对于某些特殊标本则由于脱钙的处理

而影响一些结构的观察效果。如对于牙齿釉质的观察，由于其矿化程度高因脱矿

处理而失去了它的整个形态；对于骨缺损植入生物陶瓷类材料如经脱钙则会使这

些植入材料消失而影响观察；对于一些金属材料如想观察其与组织的关系也得用

磨片的方法才可以观察更多的指标。因此，硬组织磨片为骨科、口腔科以及心血

管搭桥的研究提供了组织学方面的依据。而良好的硬组织磨片是提供这一依据的

基础。

材料和方法

1.试剂：10%中性福尔马林固定液，羟乙酰甲基丙稀酸甲酯，过氧化苯甲酰。

2.仪器：EXAKT 切磨系统

3.方法：

固定：将标本置入 10%中性福尔马林固定液中抽负压固定。

脱水：手工脱水，50%,60%,70%,80%,90%,100%梯度酒精脱水，每步 24 小时。

浸润合成树脂：将标本置入 1:1 比例的羟乙酰甲基丙稀酸甲酯和包埋剂的混

合物中 24 小时。

包埋和聚合：使用低强度光源，保持温度低于 40 度，使包埋介质进一步聚

合，约 4 小时。使用高强度的蓝光是渗透到组织内的包埋介质完全固化，约 10

小时。使用过氧化苯甲酰补充聚合，约 12 小时。

标本切割：使用 EXAKT 切磨系统一体机，将标本制成 20~50 微米厚的磨片。

染色：H-E 染色；甲苯胺兰染色法。

结果

1.带有牙齿的颌骨磨片镜下可清晰地观察到釉质、牙本质、牙周膜及颌骨的

组织学结构

2.颌骨种植体的磨片镜下可清晰地观察到新骨的结构、新生组织与种植钉的

结合程度、种植钉周围组织的炎症反应程度。 讨论及体会

在硬组织磨片制备中，首先是标本的脱水与渗透，一定要脱水完全。在羟乙

酰甲基丙稀酸甲酯浸透时，最好是在负压条件下进行，这样可以避免组织中有气

泡产生，从而影响其镜下观察。其次是磨片与载玻片的粘贴，特别是制做带有种

植体的骨磨片时，因金属与骨组织的张力不同更不易贴服紧密。本实验使用

EXAKT 粘贴系统，因其带有负压装置，可使组织片与载玻片贴附更紧密牢固，在

磨片过程中组织片不易脱落。使用 EXAKT 切磨系统一体机制备的磨片，镜下观察

组织表面磨痕少，厚度远远小于手工磨制的，因其厚度很薄易于染色并可观察到

清晰的组织学结构。

总之，硬组织磨片可以完整地保留骨组织的矿化结构，标本染色后可区分钙

化骨质与未钙化的类骨质，适用于骨形态计量参数的测量，为生物活性材料、种

植体及支架的应用研究提供了可靠的组织形态学依据。

中华医学会北京病理技术学组论坛 论文库

发表于 2012-2-10

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  图1羊，胫骨、HE染色
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  图2羊、胫骨、马松染色
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  图3Goldner染色-种植体骨磨片
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  图4小鼠踝关节1
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  图5小鼠踝关节2
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  图6大血管
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  图7大血管

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