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求助。第一次做免疫组化,不知问题出在哪里T T (已解答) 10粉蓝豆

唐晓禹 离线

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楼主 发表于 2017-07-22 18:21|举报|关注(1)
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真的是第一次做免疫组化,不知道为什么染成了图1那样,好像叫“阴阳脸”?还有图二和图三算不算好的免疫组化染色呢,一抗的浓度分别是1:100,1:200?请高手们帮帮忙啦。。。
  • 求助。第一次做免疫组化,不知问题出在哪里T T图1
    图1
  • 求助。第一次做免疫组化,不知问题出在哪里T T图2
    图2
  • 求助。第一次做免疫组化,不知问题出在哪里T T图3
    图3

楼主采纳:yuanbo(3楼  链接:>>点击查看<< )

标签:免疫组化 食管癌
本帖最后由 唐晓禹 于 2017-07-22 18:30:47 编辑
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xiaochui999 离线

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1 楼    发表于2017-08-06 08:55:08举报|引用
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 个人感觉图1是因为试剂加上后没有均匀覆盖组织导致,抗原修复液、一抗、二抗、显色液都有可能,而且不像正常阳性显色,像是泛染;图2、3诊断阳性应该没问题,至于好坏不敢妄下定论。希望有老师看到指点一下

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ssn177-杨颖 离线

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2 楼    发表于2017-09-28 17:24:14举报|引用
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 图1 的样子感觉还不是典型的阴阳脸,有时候做的过程中组织干片,或者抗原修复后液体还很热的时候就把切片拿了出来,会造成阴阳脸的着色,你可以注意一下这些细节,严格按照SOP操作试一下

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  • 唐晓禹:  十分感谢!应该是抗原修复后拿出来太快的缘故!~
    2017-11-25 16:53

yuanbo 离线

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3 楼    发表于2017-10-18 15:44:45举报|引用
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 做免疫组化多年了。给你点参考,看完三张图后,第2、3张图是阳性的,阳性部位在瘤组织细胞浆及部分细胞核,第2张图浓度过高,第3张染得可以,第一张其实是无效的,非特异性着色。把握几个关键点,自己看看问题在哪里?第一:禁止干片,尤其是抗原修复完后,最好自然冷却。第二,用组水笔画圈防止抗体没有完全覆盖组织。

2

唐晓禹

艳阳
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  • 唐晓禹:  后来重新做了,完全认同您的观点,阳性确实在胞浆和胞核,最后浓度用的是第三张的浓度,第一张确实应该和抗原修复后拿出来过快有关!十分感谢您的意见!
    2017-11-25 16:55
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