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病理特染

gl@小露 离线

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楼主 发表于 2016-08-01 15:57|举报|关注(0)
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 各位老师请问神经髓鞘特染固定有什么要求吗?染色流程怎样?想了解一下,谢谢。

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501699385 离线

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1 楼    发表于2016-08-01 20:03:00举报|引用
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 神经组织的特殊染色,大多为银浸润法,组织要求以甲醛液固定。有的如变性髓鞘,尼氏小体等的显示,则须特殊的固定液固定,否则得不出正确的结果。同时,由于神经组织及易收缩,脱水时应从低浓度的脱水剂开始。神经组织的特殊染色所用各种试剂要求化学纯,试剂用量要准确,临用时新鲜配制。配制试剂的蒸馏水以双蒸水为佳,所盛试剂的容器以清洁有色玻璃瓶;避免用金属器械或手接触试剂

髓鞘染色一般有两类,一类是正常的髓鞘,常用的有Weigert-Pal法、Loyez法、Weil法、固绿法、砂罗铬花青R法、Luxol固蓝MBS法等。 一类的是显示变性的髓鞘,正常的髓鞘不着色,变性的髓鞘才着染,常用的有Marchi法及其改良方法。

几个操作方法你自己参考下

Page氏砂罗铬花青染色法

[    ]

10%甲醛生理盐水或甲醛-钙固定液固定;石蜡切片6~10μm

[    ]

1Page氏染液:

砂罗铬花青                 0.2g

蒸馏水                    96ml

10%硫酸铁铵水溶液           4ml

硫酸溶液                 0.5ml

210%硫酸铁铵溶液

[操作步骤]

1.石蜡切片脱蜡至水。

2Page氏染液10~20分钟。

3.流水冲洗,出现蓝色。

410%铁明矾水溶液分化脱色,镜下控制,细胞核及其它组织几乎无色,流水冲洗10分钟。

5.脱水,透明,封固。

[    ]

髓鞘呈蓝色。

Loyez氏苏木精染色法(1910

[    ]

10~15%甲醛固定液固定,石蜡切片15~20μm

[    ]

4%硫酸铁铵水溶液

Loyez氏苏木精

1%盐酸酒精溶液

[操作步骤]

1.石蜡切片脱蜡至蒸馏水。

24%硫酸铁铵水溶液24小时。

3.蒸馏水充分洗。

4Loyez氏苏木精染1~2小时,56温箱中。

5.自来水浸洗10分钟。

61%盐酸酒精分化,以分清灰白质为止。

7.自来水洗10分钟。

8.脱水,透明,封固。

[    ]

髓鞘呈蓝褐色。

Marchi氏变性髓鞘锇酸冰冻切片染色法

[    ]

3mm左右的组织块固定于20%甲醛液内1~2天。

[    ]

Marchi氏液:

1%锇酸水溶液              20ml

1%氯化钾水溶液            60ml

甲醛溶液                  12ml

冰醋酸溶液                 1ml

[操作步骤]

1.组织块直接浸入Marchi氏液于暗处7~10天。

2.水洗12~24小时。

3.冰冻切片15~20微米。

4.甘油明胶封固。

[    ]

变性髓鞘呈黑色,中性脂肪呈黑色,背景呈黄色。

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寻找生命..

heroy
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