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神经组织的特殊染色,大多为银浸润法,组织要求以甲醛液固定。有的如变性髓鞘,尼氏小体等的显示,则须特殊的固定液固定,否则得不出正确的结果。同时,由于神经组织及易收缩,脱水时应从低浓度的脱水剂开始。神经组织的特殊染色所用各种试剂要求化学纯,试剂用量要准确,临用时新鲜配制。配制试剂的蒸馏水以双蒸水为佳,所盛试剂的容器以清洁有色玻璃瓶;避免用金属器械或手接触试剂
髓鞘染色一般有两类,一类是正常的髓鞘,常用的有Weigert-Pal法、Loyez法、Weil法、固绿法、砂罗铬花青R法、Luxol固蓝MBS法等。 一类的是显示变性的髓鞘,正常的髓鞘不着色,变性的髓鞘才着染,常用的有Marchi法及其改良方法。
几个操作方法你自己参考下
Page氏砂罗铬花青染色法
[固 定]
10%甲醛生理盐水或甲醛-钙固定液固定;石蜡切片6~10μm。
[试 剂]
1、Page氏染液:
砂罗铬花青
0.2g
蒸馏水
96ml
10%硫酸铁铵水溶液
4ml
硫酸溶液
0.5ml
2、10%硫酸铁铵溶液
[操作步骤]
1.石蜡切片脱蜡至水。
2.Page氏染液10~20分钟。
3.流水冲洗,出现蓝色。
4.10%铁明矾水溶液分化脱色,镜下控制,细胞核及其它组织几乎无色,流水冲洗10分钟。
5.脱水,透明,封固。
[结 果]
髓鞘呈蓝色。
Loyez氏苏木精染色法(1910)
[固 定]
10~15%甲醛固定液固定,石蜡切片15~20μm。
[试 剂]
4%硫酸铁铵水溶液
Loyez氏苏木精
1%盐酸酒精溶液
[操作步骤]
1.石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
2.4%硫酸铁铵水溶液24小时。
3.蒸馏水充分洗。
4.Loyez氏苏木精染1~2小时,56℃温箱中。
5.自来水浸洗10分钟。
6.1%盐酸酒精分化,以分清灰白质为止。
7.自来水洗10分钟。
8.脱水,透明,封固。
[结 果]
髓鞘呈蓝褐色。
Marchi氏变性髓鞘锇酸冰冻切片染色法
[固 定]
取3mm左右的组织块固定于20%甲醛液内1~2天。
[试 剂]
Marchi氏液:
1%锇酸水溶液
20ml
1%氯化钾水溶液
60ml
甲醛溶液
12ml
冰醋酸溶液
1ml
[操作步骤]
1.组织块直接浸入Marchi氏液于暗处7~10天。
2.水洗12~24小时。
3.冰冻切片15~20微米。
4.甘油明胶封固。
[结 果]
变性髓鞘呈黑色,中性脂肪呈黑色,背景呈黄色。