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各位大神,本人最近在做常规石蜡染色,核颜色总是很淡,并且出现染料沉积。同样的蜡块,去其他医院做,染色就很漂亮,排除了脱水浸蜡的问题。我换了染色剂,用跟其他医院一样的染色剂,依然颜色很淡。把返蓝液换成流水冲洗十分钟,还是颜色淡。伊红后面加了80%,90%的梯度酒精,还是没有解决问题。请问可能是哪个环节出问题?
1 | 二甲苯 | 10 min |
2 | 二甲苯 | 10 min |
5 | 100%乙醇 | 2min s |
6 | 100%乙醇 | 2min s |
7 | 95%乙醇 | 2min s |
8 | 80%乙醇 | 2min s |
9 | 70%乙醇 | 2min s |
10 | 水洗 | 1 min30s |
11 | 苏木素 | 10min |
12 | 水洗 | 5 min |
13 | 分化液 | 5 s |
14 | 返蓝 | 10s |
15 | 伊红 | 2-5 min |
16 | 100%乙醇 | 1min30 s |
17 | 100%乙醇 | 1min30 s |
20 | 二甲苯 | 5 min |
21 | 二甲苯 | 5 min |
手工染还是机器染色?
从你的片子来看,初步考虑为脱蜡没脱干净,考虑为二甲苯用太久了或者是试剂换错缸了。
按照我的经验,你现在先分化后镜下观察,估计应该也是没颜色的,然后就是不分化,苏木素染完水洗后看,如果颜色淡就要考虑是不是苏木素试剂问题,或者是脱蜡没脱干净。
如果不分化,颜色很深,那就是你分化液配错了,或者苏木素染色液质量不好。
建议苏木素后水洗一分钟,不过这个不是关键。
伊红,如果是水溶性伊红,后面的梯度酒精时间不要很长,数秒到十几秒内就可以了。
1 | 二甲苯 | 10 min |
2 | 二甲苯 | 10 min |
5 | 100%乙醇 | 2min |
6 | 100%乙醇 | 2min |
7 | 95%乙醇 | 2min |
8 | 80%乙醇 | 2min s |
9 | 70%乙醇 | 2min |
10 | 水洗 | 1 min30s |
11 | 苏木素 | 10min |
12 | 水洗 | 5 min |
13 | 分化液 | 5 s |
14 | 流水返蓝5-10分钟或氨水返蓝1-5秒 | 5-10min |
15 | 伊红染完流水冲洗1-2分钟 | 2-5 min |
16 | 80%乙醇 | 1min30 s |
17 | 95%乙醇追加两级无水乙醇各1-2分钟 | 1min30 s |
20 | 二甲苯 | 5 min |
21 | 二甲苯 | 5 min |