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求助 苏木素为什么不上色?

随风小子 离线

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楼主 发表于 2015-11-06 14:45|举报|关注(0)
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配方如下: Ehrlich氏苏木素

  • 苏木素              5g
    无水酒精             200ml
    甘油               200ml
    硫酸铝钾             20g
    蒸馏水              100ml
    冰醋酸              20ml
  • 自然阳光下氧化了4个月,细胞核不着色!!求原因??
标签:Ehrlich氏苏木素 氧化了4个月
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chaikeqin 离线

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1 楼    发表于2015-11-06 15:15:40举报|引用
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本帖最后由 chaikeqin 于 2015-11-06 15:19:53 编辑

 配方对吗?下列请参考


  • 苏木素             2.5g
    无水酒精             25ml
    硫酸铝钾(钾明矾)        50g
    或硫酸铝铵(铵明矾)
    蒸馏水              500ml
    黄*色氧化汞            1.25g
    冰醋酸              20ml

该溶液为当前最广泛使用的染液,由于它染色时间短,效果好, 很受使用者的欢迎。

配制时,先将苏木素溶于酒精(平时也可将苏木素以10%的浓度溶解好,贮存备用),取一2000ml的三角烧瓶,倾入钾明矾,加入蒸馏水,于电炉上加热,熔解钾明矾,完全熔解后,待温度至90℃左右时,加入预先溶解好的酒精苏木素,继续加热至沸腾,延续3-5min,此时溶液逐渐加深,变为紫红色,拔离电源,加入黄*色氧化汞,当充分氧化后,重新插上电源继续加热3-5min,此时溶液变深紫色,拔去电源,直接将三角烧瓶插入预先备好的冰水里,放于暗处,第二天过滤后加入冰醋酸,即可使用三个月,但据我们的实践及多年的经验认为,只要掌握好切片的“无水化”,该染液可反复使用达一年之久(天天使用)。

注意事项:

  • ①苏木素一定要预先溶解,否则较难彻底溶解。
    ②加入黄*色氧化汞后,可产生大量的气泡,因此,配制500ml的溶液,一定要选择2000ml以上的容器,否则液体便会溢出。
    ③当溶液变为深紫色后,应终止氧化,烧瓶应直接插入冰水中,不要担心玻璃瓶会爆裂,因三角烧瓶经特殊处理的,不会有爆裂的危险,如果有,那是属于产品质量问题。迅速冷却的主要目的是不让溶液过度氧化,以免缩短溶液的使用寿命。
    ④溶液过滤后方加入冰醋酸,不要颠倒过来。如果加入冰醋酸后再过滤,过滤速度将非常慢,这是因为醋酸会使滤纸中的纤维膨胀,增加了密度,使溶液不易通过,导致过滤时间延长。
    ⑤该苏木素在使用一段时间后,可以在表面产生金属膜。当出现这种现象时,可用粗滤纸捞去,否则贴于切片上将较难除去。
    ⑥苏木素加入冰醋酸后,其PH值在2-2.28之间。
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  • 随风小子:  感谢老师指导!!以前我们用的是Harris法的,看到有的报道说Ehrlich氏苏木素染核比其它的方法好,所以就实验了一下。但是效果很不好
    2015-11-07 10:15

501699385 离线

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2 楼    发表于2015-11-07 20:17:29举报|引用
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本帖最后由 501699385 于 2015-11-08 07:15:38 编辑


你现在配的苏木素不上色,你可以加热了染色试试,60多度就可以了,然后时间稍微染长点,应该是可以用的。
不上色应该是配方有点问题,苏木素粉剂的质量也不好。


Ehrlich氏苏木素配方:

  • 苏木素              5g
    无水酒精             250ml
    甘油               250ml
    硫酸铝钾             7.5g
    蒸馏水              250ml
    冰醋酸              25ml
  • 将苏木素溶于无水乙醇,硫酸铝钾溶于蒸馏水,待彻底溶解后将两液混合均匀,再加入甘油和冰醋酸。用纱布把瓶口封好,置于有阳光的窗台上,并经常轻轻摇动,约经2-4个月,此时染液呈深紫红色。
  • 染色时间15-20分钟 ,如果配置后需马上使用,可加入碘酸钠0.5g。
  • 配方转自临床病理学技术

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  • 随风小子:  感谢老师的方法!!加温60度能上色了!!
    2015-11-12 16:22
  • 501699385:  不过最好不要这样弄。苏木素还是要配好才行。这样会加速氧化,缩短苏木素的使用寿命,不知有没有可能影响以后切片的褪色。
    2015-11-12 16:46

wy1992 离线

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3 楼    发表于2015-11-12 17:48:21举报|引用
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 应该重分水洗。片子上不好有蜡或化学试剂。再不行加一点冰蜡酸(chuchuan)

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  • 随风小子:  染细胞的片子,也是不上色。用了加热的方法才上的色。
    2015-11-13 08:44
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朱正龙

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