1.1.1 尿液标本要新鲜 泌尿系统脱落的上皮细胞在尿液中易退化变性或自溶。因此,尿液排出后在1h内完成制片、固定。若不能及时制片,可按标本1/10量加入甲醛或等量的95%乙醇。
1.1.2 注意防止污染 除要求盛尿容器清洁以外,女性患者在自然排尿时,尿液中常混有大量阴道上皮细胞和白细胞而影响诊断。故可采取导尿,或清洁外阴后留取中段尿。
1.1.3 留取标本的量要充足,一般不少于50ml。
1.2 采集标本的方法
1.2.1 自然排尿 一般留取晨尿,也可留取日问新鲜尿,通常连续留取3天。
1.2.2 导尿管导尿 此法细胞成分较多,可见输尿管和肾盂的脱落细胞。
1.2.3 膀胱冲洗 用50~100ml生理盐水或Ringer液由尿道作膀胱冲洗,注入和抽取数次,获得膀胱冲洗液。
1.2.4 细胞刷片 在内镜的直视镜下,可对膀胱、输尿管及肾盂等可疑部位,刷取细胞成分,直接涂片。
1.3 制片方法
1.3.1 离心沉淀法 尿液中的细胞成分较少时,采用二次离心浓集法处理效果较好。
(1)先将全部尿液标本摇匀后,倒入4~6只离心管内,以2 000r/min,离心10min。
(2)取出上述试管,倾出上清液,将各个试管底部沉淀物摇匀后集中在一只试管内,以同样的条件再离心5~10min。
(3)倾去上清液,将沉淀物混匀。如细胞成分多,可制成薄片,如细胞成分少则取沉淀2~3滴,制成厚片,厚度以略能流动为度。每份标本一般制4张涂片。待干后,立即浸入固定液固定。
由于正常尿液中不含蛋白成分,所以细胞不易粘附在玻片上。为了防止脱落,可在沉淀物内滴加一滴血清,或在玻片上涂抹少量的甘油蛋清,然后再涂片。
若尿中含有大量盐类结晶或胶胨样物质,会引起背景污浊,影响诊断。可用0.5mol/L NaOH或0.5mol/L HCl调节尿液pH为6.0,使盐类结晶溶解。离心沉淀后,在沉淀物内加人5~10ml 95%乙醇。静置5min固定细胞,然后逐渐加入蒸馏水轻轻振动试管使胶胨样物溶解,再做第二次离心,留沉淀物涂片。
1.3.2 自然沉淀法 同脑脊液细胞沉淀法。用毛细吸管吸取尿液底部的沉淀物放入沉降筒中,尿中的细胞成分自然下沉,尿中水分被滤纸不断吸干,沉降时间一般为30min,待干后固定染色。此法所获得的细胞形态较好,但由于所取用的尿标本少,检查肿瘤的阳性率不高。
1.1.1 尿液标本要新鲜 泌尿系统脱落的上皮细胞在尿液中易退化变性或自溶。因此,尿液排出后在1h内完成制片、固定。若不能及时制片,可按标本1/10量加入甲醛或等量的95%乙醇。
1.1.2 注意防止污染 除要求盛尿容器清洁以外,女性患者在自然排尿时,尿液中常混有大量阴道上皮细胞和白细胞而影响诊断。故可采取导尿,或清洁外阴后留取中段尿。
1.1.3 留取标本的量要充足,一般不少于50ml。
1.2 采集标本的方法
1.2.1 自然排尿 一般留取晨尿,也可留取日问新鲜尿,通常连续留取3天。
1.2.2 导尿管导尿 此法细胞成分较多,可见输尿管和肾盂的脱落细胞。
1.2.3 膀胱冲洗 用50~100ml生理盐水或Ringer液由尿道作膀胱冲洗,注入和抽取数次,获得膀胱冲洗液。
1.2.4 细胞刷片 在内镜的直视镜下,可对膀胱、输尿管及肾盂等可疑部位,刷取细胞成分,直接涂片。
1.3 制片方法
1.3.1 离心沉淀法 尿液中的细胞成分较少时,采用二次离心浓集法处理效果较好。
(1)先将全部尿液标本摇匀后,倒入4~6只离心管内,以2 000r/min,离心10min。
(2)取出上述试管,倾出上清液,将各个试管底部沉淀物摇匀后集中在一只试管内,以同样的条件再离心5~10min。
(3)倾去上清液,将沉淀物混匀。如细胞成分多,可制成薄片,如细胞成分少则取沉淀2~3滴,制成厚片,厚度以略能流动为度。每份标本一般制4张涂片。待干后,立即浸入固定液固定。
由于正常尿液中不含蛋白成分,所以细胞不易粘附在玻片上。为了防止脱落,可在沉淀物内滴加一滴血清,或在玻片上涂抹少量的甘油蛋清,然后再涂片。
若尿中含有大量盐类结晶或胶胨样物质,会引起背景污浊,影响诊断。可用0.5mol/L NaOH或0.5mol/L HCl调节尿液pH为6.0,使盐类结晶溶解。离心沉淀后,在沉淀物内加人5~10ml 95%乙醇。静置5min固定细胞,然后逐渐加入蒸馏水轻轻振动试管使胶胨样物溶解,再做第二次离心,留沉淀物涂片。
1.3.2 自然沉淀法 同脑脊液细胞沉淀法。用毛细吸管吸取尿液底部的沉淀物放入沉降筒中,尿中的细胞成分自然下沉,尿中水分被滤纸不断吸干,沉降时间一般为30min,待干后固定染色。此法所获得的细胞形态较好,但由于所取用的尿标本少,检查肿瘤的阳性率不高。