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脱水后组织脱水不全或是组织过硬,怎么解决?

病理阿呆 离线

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楼主 发表于 2015-08-06 09:39|举报|关注(0)
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1.20%甲醛5小时

2.75%酒精30分钟

3.85%酒精30分钟

4.95%酒精30分钟

5.无水乙醇30分钟

6.无水乙醇30分钟

7.无水乙醇30分钟

8二甲苯30分钟

9.二甲苯30分钟

10.石蜡1小时

11.石蜡1小时

12.石蜡1小时

(石蜡温度为60度)

问题:整个过程历时12小时,我们脱水开始的时间是5点半,次日5点半程序结束,组织继续于脱水机中保温(也就是留在最后一缸中)4小时,程序会停止,我们一般于早上八点半左右开始包埋(蜡缸温度70度),这时发现组织脱水较差,包埋完切片过程发现组织较硬。

 

这个程序我们用了一段时间,有时候好,有时候不好,我们标本较少,平均每天70个蜡块,药水大概2个星期换一次,就换后面的一两缸,其余的前置。

 

请问,这套程度的问题出在哪里?最重要是这套程序有时候好用有时候不好用,这才是最头痛的!

 

昨天量过各缸酒精浓度,相差不会超过五个百分比,所以没有更换。

标签:脱水 组织过硬
本帖最后由 病理阿呆 于 2015-08-06 09:59:15 编辑
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病理那么有意思,为什么就我一个人喜欢……
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深山老林 离线

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1 楼    发表于2015-08-06 10:11:13举报|引用
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不知道您的组织取材有多大,第一张图片显示不出来,组织脱水不全可以倒回去再脱一次,效果会比现在好点。您的脱水程序个人觉得前半部分9除了固定液)时候胃镜等小标本的脱水,石蜡30min即可。如果是大标本(或者取材大一点不能超过1.5*1*0.3cm)的话:

第一缸  10%中性福尔马林固定液   2h

第二缸   75%酒精                            1h

第三缸   75%酒精                            1h

第四缸   95%酒精                            1h

第五缸   95%酒精                            1h

第六缸   无水乙醇                            1h

第七缸  无水乙醇                             1h

第八缸  二甲苯                                 30min

第九缸   二甲苯                                40min

第十缸     石蜡                                   40min

第十一缸   石蜡                                  1h

第十二缸   石蜡                                   1h

可以试试这个程序,我们一直用,脱水效果不错,挺好的。

3

heroy

小鱼吃大..

病理护航
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深山老林 离线

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2 楼    发表于2015-08-06 10:17:47举报|引用
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 你这程序有时好有时坏问题就出在取材上,如果医生取材到位,取得小点或者都是小标本那问题就不会有脱水不全的现象,可能会有些脆(第一缸石蜡时间稍微长了点,里面有二甲苯;如果是是大标本,取材厚了那就会出现脱水不全的现象,切片困难,放一段时间蜡块中间会凹陷。要么更换脱水程序,要么要求取材医生取材标准化(取小一点)。

1

病理护航
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  • 病理阿呆:  最奇怪的就是以前取材的时候组织老大块放进去,出来的组织也没有问题。现在怀疑是组织太大导致的问题就取小一点了,结果还是效果不好。 弱弱地问一下:20%的甲醛是1份甲醛4块蒸馏水没有错吧?
    2015-08-06 10:25
  • 深山老林:  20%的甲醛是1份甲醛4份蒸馏水,但是建议你最好使用10%中性福尔马林(不行就用10%福尔马林=1份甲醛9份水),20%的浓度太高了,可能也是切片脆的一个原因。
    2015-08-06 10:29
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zhshch 离线

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3 楼    发表于2015-08-06 10:22:19举报|引用
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 无水乙醇的时间有点短,固定时间拿出两个小时给无水。

1

病理护航
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  • 病理阿呆:  您后面那句是什么意思?没有看明白。
    2015-08-06 10:30
  • 深山老林:  您第一缸固定液的时间太长了,可以缩短两个小时,加在无水乙醇的时间里。
    2015-08-06 10:35
  • 病理阿呆:  只延长了无水的时间,效果有效明显改变,我再调整一下甲醛时间试一下,谢谢指正!
    2015-08-08 09:29

501699385 离线

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4 楼    发表于2015-08-08 19:13:16举报|引用
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本帖最后由 501699385 于 2015-08-09 15:14:09 编辑

1.固定液浓度过高,应该用10%福尔马林(1瓶甲醛溶液(37%—40%甲醛水溶液) +4500ml水),如果有条件,最好配成中性缓冲福尔马林使用。


2.低浓度酒精时间过短,是你们脱水不佳的关键原因。后面建议去掉一缸无水,换成95%酒精

 

建议你们的四点半开机,八点半包埋  16个小时脱水

 如果时间不够,取材时,把取好的标本盖好盖子后立即放入固定液中固定(边取边放),脱水时可以把第一缸时间缩短点


1.10%中性缓冲福尔马林(4%中性甲醛)3小时

2.75%酒精1.5小时

3.85%酒精1.5小时

4.95%酒精1.5小时

5.95%酒精1.5小时

6.无水乙醇1.5小时

7.无水乙醇1小时

8二甲苯45分钟

9.二甲苯45分钟

10.石蜡0.5小时

11.石蜡0.5小时

12.石蜡2小时

前面95%酒精之前的时间都可以适当增加,效果会更好。但是总的时间不够,只能这样了。

2

heroy

病理护航
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heroy 离线

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5 楼    发表于2015-08-11 20:01:09举报|引用
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 总结而言,甲醛浓度过高,脱水酒精时间过短。石蜡的话,要注意是高熔点还是低熔点,在设置好蜡缸温度,希望楼主能早日解决问题。

3

dingwei

15827490..

病理护航
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既然岁月无情,又何必虚度青春,像个爷们儿一样战斗吧!

18656678528 离线

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6 楼    发表于2022-06-29 13:41:14举报|引用
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 对于换液前置只能用于相同的浓度的酒精才可以,不相同的酒精是不可以前置的,是达不到理想的浓度。

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病理护航
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