免疫组化:

 EGFR19号外显子缺失型（E746A750de1）蛋白抗体（EGFR-19）、EGFR21号外显子 突变型（L858RMutant）蛋白抗体（EGFR-21）和EGFR总蛋白抗体（D38B1）（EGFR-P），均为兔单克隆 抗体（Ce11Signa1ingTechno1ogy公司），二抗采用Dako公司EnVision试剂盒。组织标本经10%中性福 尔马林固定，石蜡包埋， 4μm厚切片。常规脱蜡、水 化，3%H2O2 阻断内源性过氧化物酶，枸橼酸缓冲 液高温抗原修复，一抗37℃孵育1h，冲洗后滴加二 抗，37℃孵育30min，DAB显色，苏木精复染，冲洗 后梯度乙醇脱水、二甲苯透明，中性树胶封固。EGFR（E746-A750de1、L858RMutant和D38B1）抗体 （均按1:100稀释）。用已知EGFR基因测序阳性 病例做为阳性对照，PBS代替一抗作为阴性对照。 

结果判断 EGFR-19、EGFR-21和EGFR-P阳 性染色定位于细胞质，以细胞质内出现棕黄色颗粒状 物为阳性。根据肿瘤细胞中阳性细胞所占百分比评分：阳性细胞数≤5%为0分；6%~25%为1分；26% ~50%为2分；>50%为3分；按染色强度评分：无着 色或与背景均匀一致的较淡的黄色为0分，浅黄色为 1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。将两项结果相 乘： 0~1分为阴性（-）， 2~3分为弱阳性（+）， 4~6 分为中等阳性（2+），>6分为强阳性（3+）

结果显示：1.EGFR-19和EGFR-21的敏感性、特异 性分别为65.0%、89.4%和70.0%、97.6%。总 EGFR突变特异性蛋白敏感性为64.0%，特异性为 88.3%。 

2.EGFR突变特异性蛋白（EGFR19/21）IHC法与ARMS-PCR法检测结果存在一致 性。IHC检测（2+-3+）病例，相应ARMS-PCR法检 测的突变率分别为90.9%、100.0%，说明IHC突变 蛋白高表达的病例与ARMS-PCR法检测的突变率 一致。等

综上所述，IHC法检测EGFR基因突变蛋白表达 与EGFR基因突变有关，EGFR突变蛋白表达与微乳 头为主型和实性为主型的低分化腺癌相关；EGFR-21 突变蛋白表达增高是肿瘤侵犯胸膜的危险因素，检测 EGFR突变产物，可以作为判断肺腺癌预后的指标。 EGFR突变特异性蛋白IHC法与ARMS-PCR法检测 EGFR基因突变具有一致性，说明该方法能够成为条 件受限的基层医院检测EGFR基因突变的方法，也可 以作为检测EGFR基因突变的初筛手段。