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wangxue01 离线

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楼主 发表于 2015-07-16 15:12|举报|关注(1)
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 组化烤片结束后需二甲苯脱蜡时间是多少?

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深山老林 离线

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1 楼    发表于2015-07-16 16:31:25举报|引用
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 免疫组化烤片70度 1小时,

1.脱蜡至水:二甲苯两缸个10分钟、无水乙醇2缸、95%乙醇2缸、80%乙醇、自来水洗,蒸馏水洗

2.抗原修复:

A:高压锅热修复  高压锅烧开,切片直接浸入修复液、盖好高压锅盖带喷气阀转动,电磁炉调至中间温度,开始计时2.5分钟断开电源,冷却10分钟,蒸馏水或直接PBS洗

B:酶消化:胃蛋白酶或者胰蛋白酶消化,蒸馏水洗

3.3%双氧水(3%过氧化氢)封闭  10-15分钟

4.PBS至少3缸各3分钟,滴加一抗,室温或者37度恒温箱孵育1小时,PBS至少3缸各3分钟

5.滴加二抗37度或者室温20-30分钟,PBS至少3缸各3分钟

6.DAB显色(时间不超过10分钟)

7.苏木素复染,脱水透明,封片

我们是这样做的,效果不错,你可以试试,不知道您的操作步骤具体是什么样的,方便的话可以说一下。


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  • wangxue01:  好的,谢谢老师,下次我试试改进一下看看效果。
    2015-07-17 17:44
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以己之有限的力量,为无限的事业做一点点微不足道的事。

成 克 伦 离线

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2 楼    发表于2015-07-16 18:28:53举报|引用
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 脱干净即可

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fuyong 离线

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3 楼    发表于2015-07-17 18:37:27举报|引用
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 没有严格规定,根据各自科室工作实际,脱干净即可,烤箱中预先加热的片子可能时间可以短些。

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qzhchl 离线

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4 楼    发表于2015-07-17 22:27:39举报|引用
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 脱蜡一般每次10-15分钟,2-3次,视样本多少来定。梯度酒精洗二甲苯。重要的是脱干净蜡

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