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细胞块制备技术

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楼主 发表于 2015-01-06 06:19|举报|关注(8)
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一、直接法细胞块制备

1)积液样本静置后,取底部样本20ml,以2 000 r/min离心510分钟,吸干上清液。

2)若为血性样本,应加入冰醋酸乙醇液振荡,再离心沉淀。

3)加入4%中性缓冲甲醛液,混匀(如果沉淀量较少,应放入1ml的尖头离心管内)。

4)以2 000 r/min离心5分钟。

5)吸干上清液,轻轻沿管壁加入95%乙醇,静置12小时。

6)用尖头的硬签轻轻将沉淀物挑出,放入脱水盒。

795%乙醇120分钟。

8100%乙醇120分钟。

9)二甲苯45分钟。

1060℃石蜡30分钟。

1160℃石蜡120分钟。

12)包埋,切片,常规染色或免疫化学染色。

见图 24-16A~G

二、琼脂细胞块法

1)各种样本取20ml入离心管馁,以2 000 r/min离心5分钟。

2)除去上清液。

3)轻轻倾斜试管,用吸水纸或棉签吸去多余的液体。

4)将装有少许琼脂的试管放于45℃水浴中加热融化,之后取35滴融化的琼脂入样本试

管内,摇动试管使其充分混合。

5)将试管放入冰箱4℃冷藏20分钟。

6)待混合液呈凝胶状,用尖头的硬签挑出锥形的琼脂块。

7)将样本琼脂块放在已剪成小方块的擦镜纸上,包裹后放入脱水盒,用4%10%中性甲

醛溶液,固定2小时,常规脱水、透明、包埋。

标签:细胞
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