13 1例肺癌纤支镜毛刷DNA异倍体检测分析

王斌王贤军董吉顺

流式细胞术(FCM)可以对大量细胞进行快速、准确、多参数的定量分析及分选。作者利用FCM从2000年4月一2002年8月完成了131例纤支镜毛刷DNA异倍体的检测分析，现报道如下。

1资料与方法

1．1一般资料131例均为本院门诊或住院病人，术后病理诊断肺癌67例，男48例，女19例；年龄35—74岁，平均(61±8)岁。肺良性病变(包括结核)54例，男37例，女17例；年龄3l。72岁，平均(58±11)岁。未能定性lO例。

1．2方法(1)将纤支镜毛刷放入lO rIll盐水中洗脱，收集悬液进入试管。以1500 prm离心沉淀，以生理盐水漂洗2—3次，每次500—800 prm离心沉淀2min，弃上清液。(2)以300目筛网过滤，去除细胞团块。(3)70％冷乙醇固定，置于冰箱备检。标本送检FCM，同时将毛刷及活检标本送病理科，将两者结果作比对。以病理或细胞学的诊断结果为准，如病理或细胞学为阳性，流式诊断为阴性，则按假阴性计算；如病理或细胞学为阴性，流式诊断为阳性，则按假阳性计算。

1．3 DNA定量诊断标准参照1990年第十四届国际分析细胞学学术会的规定：(1)出现明显的非整倍体细胞峰位诊为阳性。DNA指数(DI)指被测标本细胞的DNA峰值与对照标本淋巴细胞DNA均值之比。当DI=(1±0．1)时为二倍体(2C)，当DI超过2c范围时，定为异倍体。(2)无明显的非整倍体细胞峰出现，但GO／1峰位增宽(即CV值增大)，并伴有>15％以上的超二倍体细胞群(即S期细胞)和一个明显的四倍体细胞峰位诊为阳性。

1．4统计学处理采用SPSS 10．1软件进行统计分析。

2结果

67例肺癌中DNA异倍体测定阳性55例，阴性12例，假阴性率．17．9％；54例炎性病变中DNA异倍体阴性42例，阳性12例，假阳性率22．2％。本组中FCM测定支纤镜毛刷

DNA异倍体判断肺癌的敏感性为82．1％，特异性90．1％。肺癌组中12例DNA假阴性即二倍体肿瘤病人，4例为腺癌。7例鳞癌，1例小细胞癌。10例为Ⅱ期，其中1例小细胞癌为局限型，2例为Ⅲ期；而55例DNA异倍体阳性病人中，lO例为Ⅱ期，31例为Ⅲ期，14例为Ⅳ期。本组研究结果示：随TMN分期发展，异倍体肿瘤发生率上升(见表1)。表1病理分期与癌细胞柱DNA倍体关系※表不有统计学意义P<0．05

3讨论

本组中无论是中央型肺癌，还是周围型肺癌其异倍体细胞阳性率均明显高于肺部良性病变。以异倍体细胞作为诊断肺癌的标准，敏感性为82％，特异性为90％，与文献报告“相似。因此FCM检测支纤镜毛刷DNA异倍体可以作为诊断肺癌的一个重要证据，并可弥补病理形态诊断的不足。关于肺癌细胞核DNA倍体与临床病理特征关系已有报道b】。本组资料显示肺癌细胞DNA类型在早期多表现为二倍体，而在晚期多表现为异倍体。随病理分期的进展，异倍体率由I期的0上升至Ⅱ期的50％，Ⅲ期的94％(P<0．05)，有统计学意义。由于随访时间有限，因此肿瘤二倍体率与预后的关系尚需进一步随访研究。文献报告“锍式分析的假阳性率在2％。10％左右。而本组高达22．2％，出现假阳性的原因可能由于样本中存在严重感染的炎性多核细胞。在组方图上常以多倍体细胞峰出现。对于与病理或细胞检查学不符的病例，应进行随访。

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希望老师有机会把报告 和附表一起贴出来，给我们更多的学习资料、

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