鼻咽粘膜形态计量和DNA定量测定在鼻咽癌诊断中的价值

李咸龙 李 琳

关键词 鼻咽癌症 细胞形态参数 图像分析 DNA

鼻咽癌的早期诊断较困难，实验研究和流行病学调查[1][2]表明鼻咽粘膜上皮的癌変过程是一种连续的病变，是由量变到质变的过程。既往对此变化只限于一般形态学的观察，难以为质变前的细微变化作出判断。定量分析则可发现质变前的量变。，本文釆用图象分析仪对鼻咽癌变过程的细胞形态及DNA含量进行了测定，借以探讨此种检测在鼻咽癌诊断中的应用价值。

材料和方法

一、材料 取我院病理科存挡的鼻咽粘膜活检腊块72例，按李锦添的分类法由两位嫩理医师复核诊断后将其分为4组：1，正常鼻咽上皮组10例。2，单纯增生或化生组18例。3，异形增生或化生组20例。4，鼻咽癌组24例。全部标本经常规连续切片，常规HE，Feulgen染色。

二、方法 釆用英国剑桥公司Quantimetk-900型图象分析仪，对HE染色的组织切片进行几何参数测量，在显微镜下放大1000倍，每张切片随机多点测50－100个细胞，经电脑图象处理，直接测得和间接推算出的13项参数，分别为核面积（An）,核周长（Pn），核长度（Ln）,核直径（Dn）,核圆度（Rn）,核长宽比（Ln/Bn）,核平均体积(Vn),细胞面积（Ac）,细胞周长（Pc）,细胞长度（Lc）,细胞直径（Dc）,细胞平均体积（Vc），核浆面积比（An/(Ac-An)%）.

三、DNA含量测定：Feulgen染色切片，用光波长为着60nm单色波照射，选择适当的灰庶閾值，将细胞核与背景分开，测得的细胞核积分光密度值勤（IQD）以任意单位（U）表示。每例测50－100个细胞，同一张切片还要测量正常淋巴10个，取平均数作为同张切片细胞二倍体（2C）参考值。参照有关文献，先确定2C细胞DNA含量的上限值（它等于正常对照细胞DNA含量中间值的1．25倍），依据2C细胞上限值推算出2C－4C，5C，＞5C细胞的上限值，并以此算出不同倍性细胞的DNA含量的百分比。

将以上所测数据输入IBM-XT计算机进行统计学处理，计算各组几何参数均值和标准差，DAN含量，以及DNA倍性格C，＞2－4C，5C，＞5C细胞百分数，并进行单因数方差分析及各组间两两比较。同时将DNA含量绘制直方图。对13项几何参数进行逐歩判别分析，优选出最佳参数，建立判别函数方程，回代原分类及判别分类进行检验。

 讨论

目前，细胞形态定量和DNA含量定量分析已广泛应用于全身不同脏器肿瘤的研究，为区分病变的良恶性判别预后提供了一种有力的手段（5）。

本文测定的13项几何参数中，从正常鼻咽上皮，单纯增生或化生，异形增生或化生及鼻咽癌其均值是随着病变的发展，异形细胞的增生而逐渐递增的。这种动态的逐渐变化趋势提示，从鼻咽上皮经单纯增生，异型性增生至鼻咽癌变，其细胞变化是一个从量变到质变的过程。

一般认为，鼻咽上皮单纯增生或化生与癌变无直接关系，而有些异形增生或化生可过渡到鼻咽癌，本研究也发现，单纯增生或化生组的各项参数，较正常上皮组虽有所变化，但经统计学处理大部分参数无显著性，异形增生或化生组与鼻咽癌组比较，差异非常显著，说明异形增生或化生细胞与癌细胞仍有质的不同。这对癌和癌前病变的诊断，鉴别是很有意义的。

在实际工作中，将13项细胞刑态参数全部釆用，工作量太大，且不能增加诊断的准确率。人们总是希望所需指标尽量少，准确率尽量高，因此将13项参数进行多元逐步判别分析，从13项几何参数中优选出有较高诊断及鉴别诊断的4项参数（An,Rn,Vc,An/(Ac-An)%）.并依此建立判别函数方程经回代判别分析，准确率达100％。从而提示这组判别函数是比较可靠的，这几项被选的参数能较好地全面反应癌细胞形态特征，为鼻咽癌及癌前病变提供了新的参考指标，该法简单易行， 有较高的临床价值。

 学习了