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1 石蜡切片脱蜡和水化后,用PBS冲洗3*3`。
2 对组织抗原进行相应的修复。
3 每张切片加50ul3%过氧化氢,室温下孵育10`,以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗3*3`,除去PBS液。
4 每张切片加50ul的第一抗体,室温下孵育60`。
5 PBS冲洗3*3`。除去PBS液,每张切片加50ul即用型试剂,室温下孵育10-15`。PBS冲洗3*3`。
6 除去PBS液,每张切片加100ul新鲜配置的DAB溶液,显微镜下观察3-5`。
7 自来水冲洗,苏木素复染,自来水冲洗返蓝。
8 梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。