标本的取材、制片及染色等因素都可影响细胞内DNA含量的测定。

1．      固定、酸化、染色：细胞核内的DNA可因固定不好而脱落，引起DNA含量减少；标本在Feulgen染色时，酸化很重要，如果酸化不好，核酸就不能变为含醛基的脱氧核糖核酸，DNA分子就不易与Schiff's试制结合而影响IOD；Schiff's试制染色过程中的浓度、时间和PH值均可影响细胞核测定的IOD值

2．    CV（coefficient of variance）：在同种组织中细胞之间的DNA含量也存在着一些差别，这种差别一般<2%。同种组织细胞DNA含量测定时的差别用CV来表示

             不同组织细胞CV是不同的，但这种差别多在10%以下。如果CV在10%以上，这时DNA-ICM就可测定到同种细胞内多于10%DNA含量的变化，如DNA增多。当CV为10%时，G₀/G₁细胞（二倍体细胞）DNA含量应在2c±0.2c（DI 1±0.1）之内，G₂/M细胞（四倍体细胞）DNA含量应在4c±0.4c（DI 2±0.2）之内。ESACP（European Society of Analytical Cellular Pathology）要求DNA-ICM的CV应小于5%，这样就可更精确的测定DNA含量。