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求高手解答一个her2的问题。谢谢,急。

yu1986620 离线

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楼主 发表于 2013-09-29 19:36|举报|关注(0)
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今天做了个her2,肿瘤区域绿色信号出来了,杂质的红信号也出来了,但肿瘤区域红色信号点弱到可以说做不出来,是做失败了吗?绿色信号跟红色信号的探针杂交相关联吗?是不是要两个信号出来才叫成功,只有一个就不成功,该病例免疫组化her2是++我有点怀疑fish结果是不是真的阴性。有人可以解答下吗,还是制片预处理过程的问题?病人打算使用赫塞汀的,不行的话就重做了
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谨言慎行 离线

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7 楼    发表于2013-09-30 17:38:28举报|引用
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绿信号是标记的着丝粒,红信号标记的是位点,你红绿通道都试着看一下,如果你说的杂点红绿都能看到的话就是杂质,可能你的片子或者液体不干净。

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yu198662..
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寻找生命的奇迹 离线

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11 楼    发表于2013-10-23 17:46:47举报|引用
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 可能存在的问题:

1、固定不当   2、消化不当        3、杂交后洗液的温度控制

以上几个问题都可能导致信号淬灭。

另外是国产试剂淬灭较快,建议使用国外的试剂。


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狭路相逢,勇者胜

寻找生命的奇迹 离线

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12 楼    发表于2013-10-23 17:51:11举报|引用
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 对于怎么确认是否成功,我个人认为在做HER-2时必须做阳性,阴性对照才有可比性。

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狭路相逢,勇者胜

zyc921115 离线

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10 楼    发表于2013-10-22 13:46:57举报|引用
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太高端,没见过

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向各位前辈学习

静如水 离线

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1 楼    发表于2013-09-29 20:41:00举报|引用
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 重做吧,如果HER-2是2+。不会出现无红色信号的情况。

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做好病理医生必须有一颗耐得寂寞的心,有一颗善良的心。

雁北二郎 离线

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14 楼    发表于2013-12-26 17:08:40举报|引用
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请教啥叫 杂质的红信号 ?还有  弱到可以说做不出来?是啥概念? “是不是要两个信号出来才叫成功,只有一个就不成功”?
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学如逆水行舟,不进则退。

medman_2010 离线

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16 楼    发表于2014-08-02 21:51:56举报|引用
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1.你说的很正确,首先一般有CEP17就会有HER-2,他们靠的很近

2.不知你用的是哪家的探针,反正雅培的很稳定

3. 如果就是绿色出来,红色很弱,先考虑消化是否足够(我遇过酶的浓度减半和你说的一样,加倍后就OK了)

4. 杂志和你洗涤有关系,在72度哪一步要把片子在里面提拉几次就好一点了

再有问题再说

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fuyong 离线

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15 楼    发表于2013-12-26 18:04:28举报|引用
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与对照相比,评估结果,理论上FISH阳性判断的一个比值,1.8-2.0是个介值,因此免疫组化++的病例不应该是没有红色信号的,尤其是罗氏自动免疫组化染出来的,查看全部实验流程,找出原因吧

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dingwei 离线

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6 楼    发表于2013-09-30 11:10:02举报|引用
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国产的试剂盒存在这个问题,红色总是不是很满意,有时很淡,煮的那步把蒸馏水换成柠檬酸pH6试一下。

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本人观点纯属个人偏见,希望大家独立判断,正确引用!中华病理技术网:http://www.zhbljs.com/

谨言慎行 离线

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2 楼    发表于2013-09-29 21:48:09举报|引用
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看看是不是消化过了

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jwzai 离线

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13 楼    发表于2013-11-18 10:52:08举报|引用
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气温越来越低了,脱蜡不彻底也会影响红信号的结合。我现在脱蜡,二甲苯两级,每级15分钟以上。

还有人说,延长煮片时间可以增强红信号,我由原来的90度煮20分钟,延长为30分钟,效果还不错。

金菩嘉的试剂盒红信号会比绿信号弱一点,尤其是在消化不好的情况下。

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yu1986620 离线

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3 楼    发表于2013-09-29 22:51:29举报|引用
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 消化没问题,细胞不穿孔

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yu1986620 离线

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4 楼    发表于2013-09-29 22:54:42举报|引用
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 你好老师,我想知道杂交时绿信号探针的基因与红信号是分开的吗?就是说没红的话就一定没绿吗?肿瘤红信号没出那杂信号点红出来了是什么回事?

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蓝宝石6628 离线

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5 楼    发表于2013-09-30 06:14:21举报|引用
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引用 1 楼 静如水 在 2013-09-29 20:41:00 的发言:

 重做吧,如果HER-2是2+。不会出现无红色信号的情况。


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yu1986620 离线

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8 楼    发表于2013-09-30 18:30:07举报|引用
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 老师,那算是做失败了吗?其实也不能说完全没红色,只是弱得很难判读

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yu1986620 离线

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9 楼    发表于2013-09-30 18:30:56举报|引用
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 杂点只是红色,没绿色

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