免疫组化,是应用
免疫学基本原理——
抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使
标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和
蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为
免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或
免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。
分类 免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为
免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。
实验所用的标本
实验所用主要为组织标本和
细胞标本两大类,前者包括
石蜡切片(病理切片和组织芯片)和
冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。
其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法,对于组织形态保存好,且能作
连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内
抗原暴露有一定的影响,但可进行
抗原修复,是免疫组化中首选的组织标本制作方法。
实验所用的抗体
免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体,单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体,应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后,从动物血中所获得的免疫血清,是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。
常用的染色方法
根据
标记物的不同分为
免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法,后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗体)在细胞或
亚细胞水平的定位,其中
生物素—抗生物素染色法最常用。
免疫组化,是应用
免疫学基本原理——
抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使
标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和
蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为
免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或
免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。
分类
免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为
免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。
实验所用的标本
实验所用主要为组织标本和
细胞标本两大类,前者包括
石蜡切片(病理切片和组织芯片)和
冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。
其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法,对于组织形态保存好,且能作
连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研究;石蜡切片制作过程对组织内
抗原暴露有一定的影响,但可进行
抗原修复,是免疫组化中首选的组织标本制作方法。
实验所用的抗体
免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体,单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体,应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后,从动物血中所获得的免疫血清,是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。
常用的染色方法
根据
标记物的不同分为
免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法,后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗体)在细胞或
亚细胞水平的定位,其中
生物素—抗生物素染色法最常用。