FISH操作尿液的处理

1、晨尿大于200ml，离心2000g×10min，去上清

2、若粘液比较多则加胶原酶消化30min，没10min吹打一次

3、37℃水浴20min

4、1000g×10min，去上清

5、加入2-5mlKCl低渗溶液在37℃孵育30min，没10min吹打一次

6、在母液中加入固定液3ml

7、1500g×8min，去上清，再加固定液5ml前后3次，中间要静置10min

8、离心加1-2ml的固定液后滴片

9、有杂变化就老化30min或在2×SSC37℃中30min

10、37℃胃酶40-80ul，8-10min，2×SSC洗片10min

11、甲醛固定1omin，2×SSC 洗10min

12、梯度酒精各2min

13、加探针，变性6min 78℃

14、放置42℃恒温箱

注：以下步骤与石蜡组织FISH一样