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FISH操作尿液的处理
1、晨尿大于200ml,离心2000g×10min,去上清
2、若粘液比较多则加胶原酶消化30min,没10min吹打一次
3、37℃水浴20min
4、1000g×10min,去上清
5、加入2-5mlKCl低渗溶液在37℃孵育30min,没10min吹打一次
6、在母液中加入固定液3ml
7、1500g×8min,去上清,再加固定液5ml前后3次,中间要静置10min
8、离心加1-2ml的固定液后滴片
9、有杂变化就老化30min或在2×SSC37℃中30min
10、37℃胃酶40-80ul,8-10min,2×SSC洗片10min
11、甲醛固定1omin,2×SSC 洗10min
12、梯度酒精各2min
13、加探针,变性6min 78℃
14、放置42℃恒温箱
注:以下步骤与石蜡组织FISH一样